Pereiti prie turinio
HROHep03 ląstelės
Audinys
Kepenys
Liga
Pirminė adenokarcinoma, T0NxMx stadija, 3 laipsnio
Metastazių vieta
Netaikoma (TNM stadija T0NxMx; mėginių paėmimo metu nebuvo patvirtinta tolimų metastazių)

Dokumentai

HROHep03 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300197

HROHep03 – tai žmogaus hepatoceliulinės adenokarcinomos ląstelių linija, išskirta iš 71 metų amžiaus kaukazietės pacientės pirminio kepenų naviko, esant...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HROHep03 – tai žmogaus hepatoceliulinės adenokarcinomos ląstelių linija, išskirta iš 71 metų amžiaus kaukazietės pacientės pirminio kepenų naviko, priklausanti HRO biobanko serijai, kurią sudaro iš pacientų paimtos naviko ląstelių linijos, kurias nuo 2006 m. kuria PD dr. Michael Linnebacher. Navikas buvo klasifikuotas kaip pirminė adenokarcinoma, atitinkanti TNM stadiją T0NxMx, 3 laipsnio, o tai rodo aukšto laipsnio kepenų adenokarcinomą be patvirtintų tolimųjų metastazių audinių paėmimo metu. „HROHep03“ auga kaip adhezyvinis monosluoksnis, pasižymintis fibroblastams būdinga morfologija, ir buvo patvirtinta, kad jame nėra žmogui patogeninių virusų HBV, HCV ir HIV, o tai atitinka griežtus „Linnebacher“ biobanko serijos kokybės kontrolės standartus.

HROHep03 tinka hepatoceliulinės adenokarcinomos tyrimams, aukšto laipsnio kepenų naviko ląstelių biologijos tyrimams, jautrumo vaistams ir atsparumo jiems tyrimams (sorafenibas, cisplatinas, 5-FU), kepenų naviko invazijos ir migracijos tyrimams bei molekulinės grandinės analizei. Kaip HRO biobanko dalis, ši linija suteikia pacientui būdingą biologinį išteklių, kuris gali būti suderintas su atitinkama to paties paciento imunologine medžiaga, siekiant atlikti individualizuotus onkologinius tyrimus. Jos fibroblastų tipo morfologija fenotipiškai išskiria ją iš labiau paplitusių hepatocitų tipo HCC linijų ir gali atspindėti epitelio-mezenchiminio perėjimo požymius, įgytus naviko progresavimo metu arba prisitaikant in vitro.

Audinys
Kepenys
Liga
Pirminė adenokarcinoma, T0NxMx stadija, 3 laipsnio
Metastazių vieta
Netaikoma (TNM stadija T0NxMx; mėginių paėmimo metu nebuvo patvirtinta tolimų metastazių)
Paraiškos
Hepatoceliulinės adenokarcinomos tyrimai; aukšto laipsnio HCC modeliavimas; vaistų jautrumo tyrimai (sorafenibas, cisplatinas, 5-FU); kepenų naviko invazija ir migracija; tyrimai su pacientams pritaikytais HRO biobanko mėginiais

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
Be GMO
Išsami informacija apie GMO statusą
No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Ląstelių tipas
Fibroblastų tipo (hepatoceliulinė karcinoma)
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug nuo 48 iki 72 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
HROHep03 (Cytion katalogo numeris 300197)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_2U72

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
Žmogaus patogeninių virusų HBV, HCV, ŽIV neturi.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
2 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
Kas 3-5 dienas
Atkūrimas po atšilimo
2 dienos
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
71 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių