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HROHep03 セル
ティッシュ
肝臓
病気
原発性腺がん、T0NxMx期、悪性度3
転移部位
該当なし(TNM分類:T0NxMx;検体採取時点で遠隔転移は確認されなかった)

HROHep03 セル

Cell line · 製品番号 300197

HROHep03は、…において、71歳の白人女性患者の原発性肝腫瘍から樹立されたヒト肝細胞腺癌細胞株である。

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01概要

説明

HROHep03は、2006年以降PD Dr. Michael Linnebacherによって開発された患者由来腫瘍細胞株のHROバイオバンクシリーズの一環として、71歳の白人女性患者の原発性肝腫瘍から樹立されたヒト肝細胞腺癌細胞株である。 この腫瘍は、TNM分類でT0NxMx、悪性度3の原発性腺癌と分類され、組織採取時点で遠隔転移が確認されていない高悪性度の肝腺癌であることを示している。 HROHep03は、線維芽細胞様形態を呈する付着性単層として増殖し、リンネバッハー・バイオバンク・シリーズの厳格な品質管理基準に準拠して、ヒト病原性ウイルスであるHBV、HCV、およびHIVが検出されないことが確認されています。

HROHep03は、肝細胞腺癌の研究、高悪性度肝腫瘍細胞の生物学的研究、薬剤感受性および耐性試験(ソラフェニブ、シスプラチン、5-FU)、肝腫瘍の浸潤および遊走アッセイ、ならびに分子経路解析に適用可能です。 HRO バイオバンクの一部として、この細胞株は、個別化がん研究のために、同じ患者からの対応する免疫学的材料と組み合わせることができる、患者固有の生物学的リソースを提供します。 その線維芽細胞様形態は、より一般的な肝細胞様HCC細胞株とは表現型が異なり、腫瘍の進行やin vitroでの適応過程で獲得された上皮間葉転換の特徴を反映している可能性があります。

ティッシュ
肝臓
病気
原発性腺がん、T0NxMx期、悪性度3
転移部位
該当なし(TNM分類:T0NxMx;検体採取時点で遠隔転移は確認されなかった)
用途
肝細胞腺癌の研究;高悪性度肝細胞癌(HCC)のモデル化;薬剤感受性試験(ソラフェニブ、シスプラチン、5-FU);肝腫瘍の浸潤および遊走;患者と一致したHROバイオバンクを用いた研究

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
非遺伝子組み換え
GMOのステータスに関する詳細
No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞様
細胞の種類
線維芽細胞様(肝細胞癌)
倍増時間
約48~72時間

04識別子

引用
HROHep03 (Cytion カタログ番号 300197)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_2U72

05発現と感受性

ウイルス
ヒト病原性ウイルスHBV、HCV、HIV不使用。

06取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
分割比率
1~3
播種密度
2 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
3~5日ごと
解凍後の回復
2日
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
71年
民族
白人