.jpg)
- Audums
- Aknas
- Slimība
- Primārā adenokarcinoma, T0NxMx stadija, 3. pakāpe
- Metastāžu vieta
- Neattiecas (TNM stadija T0NxMx; parauga ņemšanas brīdī nav apstiprinātas attālās metastāzes)
Dokumenti
HROHep03 Šūnas
Cell line · Preces numurs 300197
HROHep03 ir cilvēka hepatocelulārās adenokarcinomas šūnu līnija, kas izveidota no 71 gadu vecas kaukāziešu izcelsmes sievietes primārā aknu audzēja, kas atrasts...
Pielāgošana / Ieteikumi
- HROHep03 ŠūnasCell line€800.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
HROHep03 ir cilvēka hepatocelulārās adenokarcinomas šūnu līnija, kas izveidota no 71 gadu vecas kaukāziešu izcelsmes sievietes primārā aknu audzēja un ietilpst HRO biobankas sērijā, kurā iekļautas no pacientiem iegūtas audzēja šūnu līnijas, ko kopš 2006. gada izstrādājis PD Dr. Michael Linnebacher. Audzējs tika klasificēts kā primāra adenokarcinoma TNM stadijā T0NxMx, 3. pakāpē, kas atspoguļo augstas pakāpes aknu adenokarcinomu bez apstiprinātām attālām metastāzēm audu ieguves brīdī. HROHep03 aug kā adhezīva monoslāņa kultūra ar fibroblastu līdzīgu morfoloģiju, un tika apstiprināts, ka tā ir brīva no cilvēkam patogēniem vīrusiem HBV, HCV un HIV, kas atbilst Linnebacher biobankas sērijas stingrajiem kvalitātes kontroles standartiem.
HROHep03 ir piemērota hepatocelulārās adenokarcinomas pētījumiem, augstas pakāpes aknu audzēju šūnu bioloģijas izpētei, zāļu jutības un rezistences testēšanai (sorafenibs, cisplatīns, 5-FU), aknu audzēju invāzijas un migrācijas analīzēm, kā arī molekulāro ceļu analīzei. Kā daļa no HRO biobankas šī līnija nodrošina pacientam specifisku bioloģisko resursu, ko var apvienot ar atbilstošu imunoloģisko materiālu no tā paša pacienta, lai veiktu personalizētus onkoloģijas pētījumus. Tās fibroblastu līdzīgā morfoloģija fenotipiski atšķir to no izplatītākajām hepatocītu līdzīgajām HCC līnijām un var atspoguļot epitēlija-mezēnchīmas pazīmes, kas iegūtas audzēja progresijas laikā vai in vitro adaptācijas procesā.
- Audums
- Aknas
- Slimība
- Primārā adenokarcinoma, T0NxMx stadija, 3. pakāpe
- Metastāžu vieta
- Neattiecas (TNM stadija T0NxMx; parauga ņemšanas brīdī nav apstiprinātas attālās metastāzes)
- Pieteikumi
- Pētījumi par hepatocelulāro adenokarcinomu; augstas pakāpes HCC modelēšana; zāļu jutības testēšana (sorafenibs, cisplatīns, 5-FU); aknu audzēju invāzija un migrācija; pētījumi ar pacientiem atbilstošu HRO biobanku
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- Bez ĢMO
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Fibroblastiem līdzīgs
- Šūnu tips
- Fibroblastu tipa (hepatocelulārā karcinoma)
- Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
- aptuveni 48 līdz 72 stundas
04Identifikatori
- Atsauce
- HROHep03 (Cytion kataloga numurs 300197)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2U72
05Pazīmes un uzņēmība
- Vīrusi
- Nesatur cilvēka patogēnos vīrusus HBV, HCV, HIV.
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sadalījuma attiecība
- no 1 līdz 3
- Sēšanas blīvums
- 2 x 104 šūnas/cm2
- Šķidruma atjaunošana
- Ik pēc 3 līdz 5 dienām
- Atgūšanās pēc atkusņa
- 2 dienas
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 71 gads
- Etniskā piederība
- Kaukāzietis
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Tiek piemēroti līgumi ar trešajām personām
- Jā