Pāriet uz saturu
HROHep03 Šūnas
Audums
Aknas
Slimība
Primārā adenokarcinoma, T0NxMx stadija, 3. pakāpe
Metastāžu vieta
Neattiecas (TNM stadija T0NxMx; parauga ņemšanas brīdī nav apstiprinātas attālās metastāzes)

Dokumenti

HROHep03 Šūnas

Cell line · Preces numurs 300197

HROHep03 ir cilvēka hepatocelulārās adenokarcinomas šūnu līnija, kas izveidota no 71 gadu vecas kaukāziešu izcelsmes sievietes primārā aknu audzēja, kas atrasts...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HROHep03 ir cilvēka hepatocelulārās adenokarcinomas šūnu līnija, kas izveidota no 71 gadu vecas kaukāziešu izcelsmes sievietes primārā aknu audzēja un ietilpst HRO biobankas sērijā, kurā iekļautas no pacientiem iegūtas audzēja šūnu līnijas, ko kopš 2006. gada izstrādājis PD Dr. Michael Linnebacher. Audzējs tika klasificēts kā primāra adenokarcinoma TNM stadijā T0NxMx, 3. pakāpē, kas atspoguļo augstas pakāpes aknu adenokarcinomu bez apstiprinātām attālām metastāzēm audu ieguves brīdī. HROHep03 aug kā adhezīva monoslāņa kultūra ar fibroblastu līdzīgu morfoloģiju, un tika apstiprināts, ka tā ir brīva no cilvēkam patogēniem vīrusiem HBV, HCV un HIV, kas atbilst Linnebacher biobankas sērijas stingrajiem kvalitātes kontroles standartiem.

HROHep03 ir piemērota hepatocelulārās adenokarcinomas pētījumiem, augstas pakāpes aknu audzēju šūnu bioloģijas izpētei, zāļu jutības un rezistences testēšanai (sorafenibs, cisplatīns, 5-FU), aknu audzēju invāzijas un migrācijas analīzēm, kā arī molekulāro ceļu analīzei. Kā daļa no HRO biobankas šī līnija nodrošina pacientam specifisku bioloģisko resursu, ko var apvienot ar atbilstošu imunoloģisko materiālu no tā paša pacienta, lai veiktu personalizētus onkoloģijas pētījumus. Tās fibroblastu līdzīgā morfoloģija fenotipiski atšķir to no izplatītākajām hepatocītu līdzīgajām HCC līnijām un var atspoguļot epitēlija-mezēnchīmas pazīmes, kas iegūtas audzēja progresijas laikā vai in vitro adaptācijas procesā.

Audums
Aknas
Slimība
Primārā adenokarcinoma, T0NxMx stadija, 3. pakāpe
Metastāžu vieta
Neattiecas (TNM stadija T0NxMx; parauga ņemšanas brīdī nav apstiprinātas attālās metastāzes)
Pieteikumi
Pētījumi par hepatocelulāro adenokarcinomu; augstas pakāpes HCC modelēšana; zāļu jutības testēšana (sorafenibs, cisplatīns, 5-FU); aknu audzēju invāzija un migrācija; pētījumi ar pacientiem atbilstošu HRO biobanku

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
Bez ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
No genetic modification; wildtype patient-derived hepatic adenocarcinoma cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblastu tipa (hepatocelulārā karcinoma)
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 48 līdz 72 stundas

04Identifikatori

Atsauce
HROHep03 (Cytion kataloga numurs 300197)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2U72

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Nesatur cilvēka patogēnos vīrusus HBV, HCV, HIV.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
2 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 līdz 5 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
2 dienas
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
71 gads
Etniskā piederība
Kaukāzietis