
- Tissue
- כבד
- Disease
- קרצינומה הפטוצלולרית במבוגרים
- Synonyms
- huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1
Documents
HUH-1
Cell line · Product number 305553
The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים HuH-1 נגזר מקרצינומה הפטוצלולרית (HCC) אנושית, והוא נמצא בשימוש נרחב במחקר סרטן הכבד. קו תאים זה הוכיח את יכולתו לייצר ולהפריש חלבונים שונים האופייניים לכבד, לרבות אלה הנמצאים בדרך כלל בפלזמה אנושית. ראוי לציין שתאי HuH-1, כמו קווי תאים אחרים של הפטומה אנושית, יכולים לבטא ולשחרר את האנטיגן השטחי של הפטיטיס B (HBsAg) בתרבית, ובכך מספקים מודל לחקר מנגנוני HCC הקשורים לנגיף הפטיטיס B. היכולת לייצר HBsAg בתרבית מצביעה על כך שתאי HuH-1 שומרים על תפקודים מובחנים הדומים לאלה של תאי כבד in vivo.
תאי HuH-1 ממלאים תפקיד מכריע גם בחקר מנגנוני הוויסות בסרטן הכבד, במיוחד אלה הכרוכים במיקרו-רנ"א (microRNA) ובמטרותיהם. לדוגמה, מחקרים הראו כי עלייה ברמת miR-182 יכולה להגביר את הפוטנציאל הגרורתי של תאי HCC, כולל תאי HuH-1, על ידי דיכוי הביטוי של מדכא הגרורות 1 (MTSS1). הדיכוי הזה מעודד התנהגות פולשנית ומדגיש את תפקידם של מיקרו-רנ"א ספציפיים בוויסות ביטוי גנים ובהשפעה על התנהגות תאי הסרטן. תובנות אלו הן בעלות ערך רב להבנת התקדמות ה-HCC ולפיתוח אסטרטגיות טיפוליות ממוקדות.
השימוש בקו התאים HuH-1 משתרע גם למחקר על הסביבה המיקרו-סביבתית של הגידול ועל האינטראקציות שלה עם גורמים נגיפיים, מה שהופך אותו למודל מתאים לחקר הקשרים המורכבים בין אונקוגנים, גנים מדכאים וחלבונים נגיפיים. קו תאים זה מסייע בהבהרת המסלולים הרב-ממדיים של התפתחות סרטן הכבד (הפטוקארצינוגנזה) ובפיתוח טיפולים אנטי-סרטניים המותאמים לבסיס המולקולרי של סרטן הכבד.
- Tissue
- כבד
- Disease
- קרצינומה הפטוצלולרית במבוגרים
- Synonyms
- huH-1
- HuH-1
- huH 1
- HuH1
- HUh1
- HUH1
- huH1
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- HUH-1 (מספר קטלוגי של Cytion: 305553)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2956
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- מוטציה: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); מוטציה: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), הומוזיגוטית
- Viruses
- טרנספורמנט: נגיף הפטיטיס B (HBV). התאים מייצרים את האנטיגן HBs ברציפות במדיום התרבית.
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-TrypLE Express, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים באינקובציה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר האינקובציה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 2–4*10^4/סמ"ר
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 53 שנים
- Ethnicity
- יפנית
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes