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HUH-1
Tissue
Hígado
Disease
Carcinoma hepatocelular en adultos
Synonyms
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

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HUH-1

Cell line · Product number 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

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1

01General information

Description

La línea celular HuH-1 se deriva de un carcinoma hepatocelular humano (CHC) y se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer de hígado. Esta línea celular ha demostrado la capacidad de producir y secretar diversas proteínas específicas del hígado, incluidas aquellas que se encuentran típicamente en el plasma humano. Cabe destacar que las células HuH-1, al igual que otras líneas celulares de hepatoma humano, pueden expresar y liberar el antígeno de superficie de la hepatitis B (HBsAg) en cultivo, lo que las convierte en un modelo para estudiar los mecanismos del CHC relacionados con el virus de la hepatitis B. La capacidad de producir HBsAg en cultivo sugiere que las células HuH-1 conservan funciones diferenciadas similares a las de las células hepáticas in vivo.

Las células HuH-1 también son fundamentales en la investigación de los mecanismos reguladores del cáncer de hígado, en particular aquellos que involucran a los microARN y sus dianas. Por ejemplo, diversos estudios han demostrado que la sobreexpresión de miR-182 puede aumentar el potencial metastásico de las células del CHC, incluidas las HuH-1, al regular a la baja el supresor de metástasis 1 (MTSS1). Esta regulación a la baja promueve el comportamiento invasivo y resalta el papel de microARN específicos en la modulación de la expresión génica y en la influencia del comportamiento de las células cancerosas. Estos hallazgos son valiosos para comprender la progresión del CHC y desarrollar estrategias terapéuticas dirigidas.

La utilidad de la línea celular HuH-1 se extiende a la investigación sobre el microambiente tumoral y sus interacciones con elementos virales, lo que la convierte en un modelo adecuado para explorar las complejas relaciones entre oncogenes, genes supresores y proteínas virales. Esta línea celular ayuda a dilucidar las vías multifacéticas de la hepatocarcinogénesis y al desarrollo de terapias contra el cáncer adaptadas a los fundamentos moleculares del cáncer de hígado.

Tissue
Hígado
Disease
Carcinoma hepatocelular en adultos
Synonyms
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial

04Identifiers

Citation
HUH-1 (número de catálogo de Cytion 305553)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05Expression and susceptibility

Mutational profile
Mutación: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutación: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homocigótica
Viruses
Transformante: Virus de la hepatitis B (VHB). Las células producen el antígeno HBs de manera continua en el medio de cultivo.

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con TrypLE Express, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas y, a continuación, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Seeding density
2-4*10^4/cm²
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
53 años
Ethnicity
Japonés