Mine otse sisu juurde
HUH-1
Kude
Maksa
Haigus
Täiskasvanute hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

Dokumendid

HUH-1

Cell line · Toote number 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HuH-1 rakuliin on saadud inimese hepatotsellulaarsest kartsinoomist (HCC) ja seda kasutatakse laialdaselt maksavähi uurimisel. See rakuliin on näidanud võimet toota ja eritada mitmesuguseid maksaspetsiifilisi valke, sealhulgas neid, mida tavaliselt leidub inimese plasmas. Tähelepanuväärne on, et HuH-1 rakud, nagu ka teised inimese hepatoma rakuliinid, suudavad kultuuris ekspresseerida ja eritada B-hepatiidi pinnantigeeni (HBsAg), pakkudes mudelit B-hepatiidi viirusega seotud HCC mehhanismide uurimiseks. Võime toota HBsAg-d kultuuris viitab sellele, et HuH-1 rakud säilitavad diferentseerunud funktsioone, mis sarnanevad in vivo maksarakkude omadega.

HuH-1 rakud on olulised ka maksavähi regulatsioonimehhanismide uurimisel, eriti nende puhul, mis hõlmavad mikroRNA-sid ja nende sihtmärke. Näiteks on uuringud näidanud, et miR-182 ülesreguleerimine võib suurendada HCC-rakkude, sealhulgas HuH-1 rakkude, metastaasipotentsiaali, allareguleerides metastaasisupressorit 1 (MTSS1). See allaregulatsioon soodustab invasiivset käitumist ja rõhutab spetsiifiliste mikroRNA-de rolli geeniekspressiooni moduleerimisel ja vähirakkude käitumise mõjutamisel. Sellised teadmised on väärtuslikud HCC progresseerumise mõistmiseks ja sihtotstarbeliste ravistrateegiate väljatöötamiseks.

HuH-1 rakuliini kasulikkus ulatub ka kasvajamikrokeskkonna ja selle vastastikmõjude uurimiseni viiruslike elementidega, muutes selle sobivaks mudeliks onkogeenide, supressorgeenide ja viiruslike valkude vaheliste keerukate seoste uurimiseks. See rakuliin aitab selgitada maksavähi tekke mitmekülgseid mehhanisme ning arendada maksavähi molekulaarsetele alustele kohandatud vähivastaseid ravimeetodeid.

Kude
Maksa
Haigus
Täiskasvanute hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
HUH-1 (Cytioni katalooginumber 305553)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutatsioon: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homosügootne
Viirused
Transformant: B-hepatiidi viirus (HBV). Rakud toodavad kultuurikeskkonnas pidevalt HBs-antigeeni.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2–4 × 10⁴/cm²
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
53 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani