Siirry sisältöön
HUH-1
Kudos
Maksa
Sairaus
Aikuisten hepatosellulaarinen karsinooma
Synonyymit
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

Asiakirjat

HUH-1

Cell line · Tuotenumero 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HuH-1-solulinja on peräisin ihmisen hepatosellulaarisesta karsinoomasta (HCC), ja sitä käytetään laajasti maksasyövän tutkimuksessa. Tämä solulinja on osoittanut kykenevänsä tuottamaan ja erittämään erilaisia maksakohtaisia proteiineja, mukaan lukien proteiineja, joita tyypillisesti esiintyy ihmisen plasmassa. Huomionarvoista on, että HuH-1-solut, kuten muutkin ihmisen hepatomasolulinjat, pystyvät ilmentämään ja erittämään B-hepatiitin pinta-antigeenia (HBsAg) viljelmässä, mikä tarjoaa mallin B-hepatiittivirukseen liittyvien HCC-mekanismien tutkimiseen. Kyky tuottaa HBsAg:ta viljelmässä viittaa siihen, että HuH-1-solut säilyttävät erilaistuneet toiminnot, jotka ovat samanlaisia kuin maksasolujen toiminnot in vivo.

HuH-1-solut ovat keskeisessä asemassa myös maksasyövän säätelymekanismien tutkimuksessa, erityisesti niissä, joihin liittyy mikroRNA:ita ja niiden kohdegeenejä. Esimerkiksi tutkimukset ovat osoittaneet, että miR-182:n ilmentymisen lisääntyminen voi tehostaa HCC-solujen, mukaan lukien HuH-1-solujen, metastaattista potentiaalia säätelemällä alaspäin metastaasien estäjää 1 (MTSS1). Tämä ilmentymisen heikentyminen edistää invasiivista käyttäytymistä ja korostaa tiettyjen mikroRNA:iden roolia geenien ilmentymisen säätelyssä ja syöpäsolujen käyttäytymiseen vaikuttamisessa. Tällaiset havainnot ovat arvokkaita HCC:n etenemisen ymmärtämisessä ja kohdennettujen hoitostrategioiden kehittämisessä.

HuH-1-solulinjan käyttökelpoisuus ulottuu kasvaimen mikroympäristön ja sen vuorovaikutusten tutkimukseen viruselementtien kanssa, mikä tekee siitä sopivan mallin onkogeenien, suppressorigeenien ja virusproteiinien välisten monimutkaisten suhteiden tutkimiseen. Tämä solulinja auttaa selventämään maksasyövän syntymisen monitahoisia reittejä sekä kehittämään maksasyövän molekyylitason perusteisiin räätälöityjä syöpälääkityksiä.

Kudos
Maksa
Sairaus
Aikuisten hepatosellulaarinen karsinooma
Synonyymit
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
HUH-1 (Cytionin tuotenumero 305553)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutaatio: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homotsygootti
Virukset
Transformantti: B-hepatiittivirus (HBV). Solut tuottavat HBs-antigeeniä jatkuvasti viljelyliuoksessa.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan TrypLE Express -valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen sekoita solut varovasti 10 ml:lla elatusainetta niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoi sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2–4 × 10⁴/cm²
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
53 vuotta
Etnisyys
Japanilainen