Gå til innholdet
HUH-1
Vev
Lever
Sykdom
Hepatocellulært karsinom hos voksne
Synonymer
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

Dokumenter

HUH-1

Cell line · Produktnummer 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HuH-1-cellelinjen stammer fra et humant hepatocellulært karsinom (HCC) og brukes i stor utstrekning i forskning på leverkreft. Denne cellelinjen har vist seg i stand til å produsere og utskille ulike leverspesifikke proteiner, blant annet proteiner som vanligvis finnes i humant plasma. Det er verdt å merke seg at HuH-1-celler, i likhet med andre humane hepatomcellelinjer, kan uttrykke og frigjøre hepatitt B-overflateantigen (HBsAg) i kultur, noe som gir en modell for å studere mekanismer knyttet til hepatitt B-virusrelatert HCC. Evnen til å produsere HBsAg i kultur tyder på at HuH-1-celler beholder differensierte funksjoner som ligner på de som finnes hos leverceller in vivo.

HuH-1-celler spiller også en avgjørende rolle i undersøkelsen av reguleringsmekanismer ved leverkreft, særlig de som involverer mikroRNA og deres mål. Studier har for eksempel vist at oppregulering av miR-182 kan øke metastasepotensialet til HCC-celler, inkludert HuH-1, ved å nedregulere metastasesuppressor 1 (MTSS1). Denne nedreguleringen fremmer invasiv atferd og understreker rollen til spesifikke mikroRNAer i å modulere genuttrykk og påvirke kreftcellers atferd. Slike innsikter er verdifulle for å forstå progresjonen av HCC og utvikle målrettede behandlingsstrategier.

HuH-1-cellelinjens anvendelighet strekker seg til forskning på tumorens mikromiljø og dets interaksjoner med virale elementer, noe som gjør den til en egnet modell for å utforske de komplekse sammenhengene mellom onkogener, suppressorgener og virale proteiner. Denne cellelinjen bidrar til å belyse de mangesidige veiene for hepatokarsinogenese og utviklingen av kreftbehandlinger som er skreddersydd til leverkreftens molekylære grunnlag.

Vev
Lever
Sykdom
Hepatocellulært karsinom hos voksne
Synonymer
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HUH-1 (Cytion-katalognummer 305553)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
Mutasjon: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutasjon: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homozygot
Virus
Transformant: Hepatitt B-virus (HBV). Cellene produserer HBs-antigen kontinuerlig i dyrkningsmediet.

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber, og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med TrypLE Express, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2–4 × 10⁴/cm²
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
53 år
Etnisitet
Japansk