İçeriğe atla
HUH-1
Doku
Karaciğer
Hastalık
Yetişkin hepatosellüler karsinom
Eş anlamlılar
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

HUH-1

Cell line · Ürün numarası 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HuH-1 hücre hattı, bir insan hepatoselüler karsinomundan (HCC) türetilmiştir ve karaciğer kanseri araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattı, insan plazmasında tipik olarak bulunanlar da dahil olmak üzere çeşitli karaciğere özgü proteinleri üretme ve salgılama yeteneği sergilemiştir. Özellikle, HuH-1 hücreleri, diğer insan hepatoma hücre hatları gibi, kültür ortamında hepatit B yüzey antijeni (HBsAg) eksprese edebilir ve salgılayabilir; bu da hepatit B virüsüyle ilişkili HCC mekanizmalarını incelemek için bir model sağlar. Kültür ortamında HBsAg üretme yeteneği, HuH-1 hücrelerinin in vivo karaciğer hücrelerine benzer farklılaşmış işlevlerini koruduğunu göstermektedir.

HuH-1 hücreleri ayrıca, karaciğer kanserindeki düzenleyici mekanizmaların, özellikle de mikroRNA'lar ve bunların hedeflerini içeren mekanizmaların araştırılmasında önemli bir rol oynamaktadır. Örneğin, yapılan çalışmalar, miR-182'nin yukarı regülasyonunun, metastaz baskılayıcı 1'i (MTSS1) aşağı regüle ederek HuH-1 dahil HCC hücrelerinin metastaz potansiyelini artırabileceğini göstermiştir. Bu aşağı regülasyon, invaziv davranışı teşvik eder ve belirli mikroRNA'ların gen ekspresyonunu modüle etmedeki ve kanser hücresi davranışını etkilemedeki rolünü vurgular. Bu tür bilgiler, HCC'nin ilerleyişini anlamak ve hedefe yönelik tedavi stratejileri geliştirmek açısından değerlidir.

HuH-1 hücre hattının kullanımı, tümör mikroçevresi ve bunun viral unsurlarla etkileşimleri üzerine yapılan araştırmalara kadar uzanır; bu da onu, onkogenler, baskılayıcı genler ve viral proteinler arasındaki karmaşık ilişkileri araştırmak için uygun bir model haline getirir. Bu hücre hattı, hepatosarkinomogenezinin çok yönlü yolaklarının aydınlatılmasına ve karaciğer kanserinin moleküler temellerine göre uyarlanmış antikanser tedavilerinin geliştirilmesine yardımcı olmaktadır.

Doku
Karaciğer
Hastalık
Yetişkin hepatosellüler karsinom
Eş anlamlılar
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HUH-1 (Cytion katalog numarası 305553)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutasyon: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homozigot
Virüsler
Transformant: Hepatit B virüsü (HBV). Hücreler, kültür ortamında sürekli olarak HBs antijeni üretmektedir.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri TrypLE Express ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2-4*10⁴/cm²
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
53 yıl
Etnik köken
Japonca