Prejsť na obsah
HUH-1
Tkanivo
Pečeň
Choroba
Hepatocelulárny karcinóm u dospelých
Synonymá
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

Dokumenty

HUH-1

Cell line · Číslo výrobku 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka HuH-1 pochádza z ľudského hepatocelulárneho karcinómu (HCC) a vo veľkej miere sa využíva vo výskume rakoviny pečene. Táto bunka preukázala schopnosť produkovať a vylučovať rôzne proteíny špecifické pre pečeň, vrátane tých, ktoré sa bežne vyskytujú v ľudskej plazme. Je potrebné poznamenať, že bunky HuH-1, podobne ako iné ľudské hepatómové bunkové línie, môžu v kultúre exprimovať a uvoľňovať povrchový antigén hepatitídy B (HBsAg), čím poskytujú model na štúdium mechanizmov HCC súvisiacich s vírusom hepatitídy B. Schopnosť produkovať HBsAg v kultúre naznačuje, že bunky HuH-1 si zachovávajú diferencované funkcie podobné tým, aké majú pečeňové bunky in vivo.

Bunky HuH-1 zohrávajú kľúčovú úlohu aj pri skúmaní regulačných mechanizmov pri rakovine pečene, najmä tých, ktoré zahŕňajú mikroRNA a ich ciele. Štúdie napríklad preukázali, že zvýšená expresia miR-182 môže zvýšiť metastatický potenciál buniek HCC, vrátane buniek HuH-1, prostredníctvom zníženia expresie supresora metastáz 1 (MTSS1). Táto downregulácia podporuje invazívne správanie a zdôrazňuje úlohu špecifických mikroRNA pri modulácii génovej expresie a ovplyvňovaní správania rakovinových buniek. Takéto poznatky sú cenné pre pochopenie progresie HCC a vývoj cielených terapeutických stratégií.

Využiteľnosť buneckej línie HuH-1 sa rozširuje aj na výskum mikroprostredia nádoru a jeho interakcií s vírusovými prvkami, čo z nej robí vhodný model na skúmanie zložitých vzťahov medzi onkogénmi, supresorovými génmi a vírusovými proteínmi. Táto bunková línia pomáha objasniť mnohostranné dráhy hepatokarcinogenézy a vývoj protinádorových terapií prispôsobených molekulárnym základom rakoviny pečene.

Tkanivo
Pečeň
Choroba
Hepatocelulárny karcinóm u dospelých
Synonymá
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citácia
HUH-1 (katalógové číslo Cytion 305553)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutácia: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homozygotná
Vírusy
Transformant: vírus hepatitídy B (HBV). Bunky nepretržite produkujú HBs-antigén v kultivačnom médiu.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne zakryte prípravkom TrypLE Express, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
2–4 × 10⁴/cm²
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
53 rokov
Etnická príslušnosť
Japonský