Pereiti prie turinio
HUH-1
Audinys
Kepenys
Liga
Suaugusiųjų hepatocelulinė karcinoma
Sinonimai
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

Dokumentai

HUH-1

Cell line · Prekės numeris 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HuH-1 ląstelių linija yra išskirta iš žmogaus hepatoceliulinės karcinomos (HCC) ir plačiai naudojama kepenų vėžio tyrimuose. Ši ląstelių linija pasižymi gebėjimu gaminti ir išskirti įvairius kepenims būdingus baltymus, įskaitant tuos, kurie paprastai randami žmogaus plazmoje. Pažymėtina, kad HuH-1 ląstelės, kaip ir kitos žmogaus hepatomos ląstelių linijos, kultūroje gali ekspresuoti ir išskirti hepatito B paviršiaus antigeną (HBsAg), taip suteikdamos modelį hepatito B viruso susijusių HCC mechanizmų tyrimams. Gebėjimas kultūroje gaminti HBsAg rodo, kad HuH-1 ląstelės išlaiko diferencijuotas funkcijas, panašias į kepenų ląstelių funkcijas in vivo.

HuH-1 ląstelės taip pat yra svarbios tiriant kepenų vėžio reguliavimo mechanizmus, ypač tuos, kuriuose dalyvauja mikroRNR ir jų taikiniai. Pavyzdžiui, tyrimai parodė, kad miR-182 ekspresijos padidėjimas gali sustiprinti HCC ląstelių, įskaitant HuH-1, metastazavimo potencialą, slopindamas metastazių slopintojo 1 (MTSS1) ekspresiją. Šis slopinimas skatina invazinį elgesį ir pabrėžia konkrečių mikroRNR vaidmenį reguliuojant genų ekspresiją bei darant įtaką vėžio ląstelių elgesiui. Tokios įžvalgos yra vertingos siekiant suprasti HCC progresavimą ir kuriant tikslinės terapijos strategijas.

HuH-1 ląstelių linijos pritaikymas apima tyrimus, susijusius su naviko mikroaplinka ir jos sąveika su virusiniais elementais, todėl ji yra tinkamas modelis, leidžiantis tirti sudėtingus ryšius tarp onkogenų, slopinančiųjų genų ir virusinių baltymų. Ši ląstelių linija padeda išsiaiškinti daugialypius hepatokarcinogenezės kelius ir kurti priešvėžines terapijas, pritaikytas prie kepenų vėžio molekulinės struktūros.

Audinys
Kepenys
Liga
Suaugusiųjų hepatocelulinė karcinoma
Sinonimai
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
HUH-1 (Cytion katalogo numeris 305553)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
Mutacija: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutacija: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homozigotinė
Virusai
Transformantas: hepatito B virusas (HBV). Ląstelės nuolat gamina HBs antigeną auginimo terpėje.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tada visiškai užtepkite "TrypLE Express", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
2–4 × 10⁴/cm²
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
53 metai
Etninė priklausomybė
Japonų