Gå direkte til indholdet
HUH-1
Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom hos voksne
Synonymer
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

Dokumenter

HUH-1

Cell line · Varenummer 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

€550.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HuH-1-cellelinjen stammer fra et humant hepatocellulært karcinom (HCC) og anvendes i vid udstrækning i forskning i leverkræft. Denne cellelinje har vist evnen til at producere og udskille forskellige leverspecifikke proteiner, herunder sådanne, der typisk findes i humant plasma. Det er især værd at bemærke, at HuH-1-celler, ligesom andre humane hepatomcellelinjer, kan udtrykke og udskille hepatitis B-overfladeantigen (HBsAg) i kultur, hvilket giver en model til at studere mekanismerne bag HCC relateret til hepatitis B-virus. Evnen til at producere HBsAg i kultur tyder på, at HuH-1-celler bevarer differentierede funktioner, der ligner dem, som leverceller har in vivo.

HuH-1-celler spiller også en afgørende rolle i undersøgelsen af reguleringsmekanismer i leverkræft, især dem, der involverer mikroRNA'er og deres mål. For eksempel har studier vist, at opregulering af miR-182 kan øge det metastatiske potentiale hos HCC-celler, herunder HuH-1, ved at nedregulere metastaseundertrykkeren 1 (MTSS1). Denne nedregulering fremmer invasiv adfærd og understreger den rolle, som specifikke mikroRNA’er spiller i moduleringen af genekspression og påvirkningen af kræftcellernes adfærd. Sådanne indsigter er værdifulde for forståelsen af HCC’s progression og udviklingen af målrettede terapeutiske strategier.

HuH-1-cellelinjens anvendelighed strækker sig til forskning i tumorens mikromiljø og dets interaktioner med virale elementer, hvilket gør den til en velegnet model til at udforske de indviklede sammenhænge mellem onkogener, suppressorgener og virale proteiner. Denne cellelinje bidrager til at belyse de mangesidede veje i hepatokarcinogenesen og udviklingen af kræftbehandlinger, der er skræddersyet til leverkræftens molekylære grundlag.

Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom hos voksne
Synonymer
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HUH-1 (Cytion-katalognummer 305553)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Mutation: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutation: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homozygot
Vira
Transformant: Hepatitis B-virus (HBV). Cellerne producerer løbende HBs-antigen i dyrkningsmediet.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS uden calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med TrypLE Express, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2–4 × 10⁴/cm²
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
53 år
Etnisk tilhørsforhold
Japansk