Přejít na obsah
HUH-1
Tkáň
Játra
Nemoc
Hepatocelulární karcinom u dospělých
Synonyma
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

Dokumenty

HUH-1

Cell line · Číslo výrobku 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie HuH-1 pochází z lidského hepatocelulárního karcinomu (HCC) a je hojně využívána ve výzkumu rakoviny jater. Tato buněčná linie prokázala schopnost produkovat a vylučovat různé proteiny specifické pro játra, včetně těch, které se typicky vyskytují v lidské plazmě. Je pozoruhodné, že buňky HuH-1, stejně jako jiné lidské hepatomové buněčné linie, mohou v kultuře exprimovat a uvolňovat povrchový antigen hepatitidy B (HBsAg), čímž poskytují model pro studium mechanismů HCC souvisejících s virem hepatitidy B. Schopnost produkovat HBsAg v kultuře naznačuje, že buňky HuH-1 si zachovávají diferencované funkce podobné těm, které mají jaterní buňky in vivo.

Buňky HuH-1 hrají také klíčovou roli při zkoumání regulačních mechanismů u rakoviny jater, zejména těch, které zahrnují mikroRNA a jejich cíle. Studie například prokázaly, že zvýšená exprese miR-182 může zvýšit metastatický potenciál buněk HCC, včetně buněk HuH-1, a to prostřednictvím snížení exprese genu metastasis suppressor 1 (MTSS1). Tato downregulace podporuje invazivní chování a zdůrazňuje roli specifických mikroRNA při modulaci genové exprese a ovlivňování chování nádorových buněk. Tyto poznatky jsou cenné pro pochopení progrese HCC a vývoj cílených terapeutických strategií.

Využitelnost buněčné linie HuH-1 sahá až k výzkumu mikroprostředí nádoru a jeho interakcí s virovými prvky, což z ní činí vhodný model pro zkoumání složitých vztahů mezi onkogeny, supresorovými geny a virovými proteiny. Tato buněčná linie pomáhá objasnit mnohostranné cesty hepatokarcinogeneze a vývoj protinádorových terapií přizpůsobených molekulárním základům rakoviny jater.

Tkáň
Játra
Nemoc
Hepatocelulární karcinom u dospělých
Synonyma
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
HUH-1 (katalogové číslo Cytion 305553)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutace: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homozygotní
Viry
Transformant: virus hepatitidy B (HBV). Buňky v kultivačním médiu nepřetržitě produkují antigen HBs.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem TrypLE Express, a to 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2–4 × 10⁴/cm²
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
53 let
Etnická příslušnost
Japonský