Pāriet uz saturu
HUH-1
Audums
Aknas
Slimība
Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

Dokumenti

HUH-1

Cell line · Preces numurs 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HuH-1 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka hepatocelulārās karcinomas (HCC) un tiek plaši izmantota aknu vēža pētījumos. Šī šūnu līnija ir parādījusi spēju ražot un izdalīt dažādus aknām raksturīgus proteīnus, tostarp tos, kas parasti sastopami cilvēka plazmā. Jāatzīmē, ka HuH-1 šūnas, tāpat kā citas cilvēka hepatomas šūnu līnijas, kultūrā var ekspresēt un izdalīt B hepatīta virsmas antigēnu (HBsAg), tādējādi nodrošinot modeli B hepatīta vīrusam saistīto HCC mehānismu izpētei. Spēja ražot HBsAg kultūrā liecina, ka HuH-1 šūnas saglabā diferencētas funkcijas, kas līdzīgas aknu šūnu funkcijām in vivo.

HuH-1 šūnas ir nozīmīgas arī aknu vēža regulējošo mehānismu izpētē, jo īpaši tajos, kuros iesaistīti mikroRNS un to mērķi. Piemēram, pētījumi ir parādījuši, ka miR-182 ekspresijas paaugstināšanās var pastiprināt HCC šūnu, tostarp HuH-1, metastāzēšanas potenciālu, samazinot metastāžu supresora 1 (MTSS1) ekspresiju. Šī ekspresijas samazināšanās veicina invazīvu uzvedību un uzsver konkrētu mikroRNA lomu gēnu ekspresijas modulēšanā un vēža šūnu uzvedības ietekmēšanā. Šādi atklājumi ir vērtīgi, lai izprastu HCC progresēšanu un izstrādātu mērķtiecīgas terapeitiskas stratēģijas.

HuH-1 šūnu līnijas lietderība attiecas arī uz pētījumiem par audzēja mikrovidē un tās mijiedarbību ar vīrusu elementiem, padarot to par piemērotu modeli, lai izpētītu sarežģītās attiecības starp onkogēniem, supresoru gēniem un vīrusu proteīniem. Šī šūnu līnija palīdz noskaidrot daudzpusējās hepatokarcinogēzes ceļus un izstrādāt pretvēža terapijas, kas pielāgotas aknu vēža molekulārajam pamatam.

Audums
Aknas
Slimība
Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
HUH-1 (Cytion kataloga numurs 305553)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutācija: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homozigota
Vīrusi
Transformants: B hepatīta vīruss (HBV). Šūnas kultūras vidē nepārtraukti ražo HBs-antigēnu.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar TrypLE Express, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2–4 × 10⁴/cm²
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
53 gadi
Etniskā piederība
Japāņu