Gå direkt till innehållet
HUH-1
Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom hos vuxna
Synonymer
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

HUH-1

Cell line · Produktnummer 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

€550.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen HuH-1 härstammar från ett humant hepatocellulärt karcinom (HCC) och används i stor utsträckning inom forskningen om levercancer. Denna cellinje har visat sig kunna producera och utsöndra olika leverspecifika proteiner, däribland sådana som vanligtvis förekommer i humant plasma. Det är värt att notera att HuH-1-celler, liksom andra humana hepatomcellinjer, kan uttrycka och utsöndra hepatit B-ytantigen (HBsAg) i odling, vilket ger en modell för att studera mekanismerna bakom HCC relaterat till hepatit B-viruset. Förmågan att producera HBsAg i odling tyder på att HuH-1-celler behåller differentierade funktioner som liknar de hos leverceller in vivo.

HuH-1-celler spelar också en viktig roll i undersökningen av regleringsmekanismer vid levercancer, särskilt sådana som involverar mikro-RNA och deras mål. Studier har till exempel visat att uppreglering av miR-182 kan öka metastaseringspotentialen hos HCC-celler, inklusive HuH-1, genom att nedreglera metastasundertryckaren 1 (MTSS1). Denna nedreglering främjar invasivt beteende och belyser den roll som specifika mikro-RNA spelar för att modulera genuttryck och påverka cancercellernas beteende. Sådana insikter är värdefulla för att förstå utvecklingen av HCC och för att utveckla riktade behandlingsstrategier.

HuH-1-cellinjen kan även användas i forskning om tumörens mikromiljö och dess interaktioner med virala element, vilket gör den till en lämplig modell för att utforska de komplexa sambanden mellan onkogener, suppressorgener och virala proteiner. Denna cellinje bidrar till att belysa de mångfacetterade vägarna för hepatokarcinogenes och utvecklingen av cancerbehandlingar som är skräddarsydda efter levercancerns molekylära grunder.

Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom hos vuxna
Synonymer
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande

04Identifierare

Källa
HUH-1 (Cytion-katalognummer 305553)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05Uttryck och mottaglighet

Mutationsprofil
Mutation: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutation: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homozygot
Virus
Transformant: Hepatit B-virus (HBV). Cellerna producerar HBs-antigen kontinuerligt i odlingsmediet.

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med TrypLE Express, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
2–4 × 10⁴/cm²
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
53 år
Etnicitet
Japanska