Ga naar de inhoud
HUH-1
Weefsel
Lever
Ziekte
Hepatocellulair carcinoom bij volwassenen
Synoniemen
huH-1, HuH-1, huH 1, HuH1, HUh1, HUH1, huH1

Documenten

HUH-1

Cell line · Productnummer 305553

The HuH-1 cell line is derived from a human hepatocellular carcinoma (HCC) and is used extensively in liver cancer research. This cell line has shown the ...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HuH-1-cellijn is afgeleid van een humaan hepatocellulair carcinoom (HCC) en wordt op grote schaal gebruikt in onderzoek naar leverkanker. Deze cellijn heeft aangetoond dat ze in staat is om diverse leverspecifieke eiwitten te produceren en uit te scheiden, waaronder eiwitten die doorgaans in menselijk plasma worden aangetroffen. Opvallend is dat HuH-1-cellen, net als andere menselijke hepatomacellijnen, in kweek het hepatitis B-oppervlakteantigeen (HBsAg) tot expressie kunnen brengen en kunnen afgeven, waardoor ze een model vormen voor het bestuderen van HCC-mechanismen die verband houden met het hepatitis B-virus. Het vermogen om HBsAg in kweek te produceren, suggereert dat HuH-1-cellen gedifferentieerde functies behouden die vergelijkbaar zijn met die van levercellen in vivo.

HuH-1-cellen spelen ook een cruciale rol bij het onderzoek naar regulerende mechanismen bij leverkanker, met name die waarbij microRNA’s en hun doelwitten betrokken zijn. Studies hebben bijvoorbeeld aangetoond dat een verhoogde expressie van miR-182 het metastatisch potentieel van HCC-cellen, waaronder HuH-1, kan versterken door metastase-suppressor 1 (MTSS1) te onderdrukken. Deze onderdrukking bevordert invasief gedrag en benadrukt de rol van specifieke microRNA's bij het moduleren van genexpressie en het beïnvloeden van het gedrag van kankercellen. Dergelijke inzichten zijn waardevol voor het begrijpen van de progressie van HCC en het ontwikkelen van gerichte therapeutische strategieën.

Het nut van de HuH-1-cellijn strekt zich uit tot onderzoek naar de tumor-micro-omgeving en de interacties daarvan met virale elementen, waardoor deze een geschikt model is voor het verkennen van de ingewikkelde relaties tussen oncogenen, suppressorgenen en virale eiwitten. Deze cellijn helpt bij het ophelderen van de veelzijdige routes van hepatocarcinogenese en de ontwikkeling van antikankertherapieën die zijn afgestemd op de moleculaire basis van leverkanker.

Weefsel
Lever
Ziekte
Hepatocellulair carcinoom bij volwassenen
Synoniemen
  • huH-1
  • HuH-1
  • huH 1
  • HuH1
  • HUh1
  • HUH1
  • huH1

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HUH-1 (Cytion-catalogusnummer 305553)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2956

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: AXIN1, p.Asn302Profs*111 (c.904_907delAACC); Mutatie: TP53, p.Arg110Leu (c.329G>T), homozygoot
Virussen
Transformant: hepatitis B-virus (HBV). De cellen produceren continu HBs-antigeen in het kweekmedium.

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met TrypLE Express, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Meng de cellen na incubatie voorzichtig met 10 ml medium om ze te resuspenderen en centrifugeer vervolgens gedurende 3 minuten bij 300xg. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2-4*10⁴/cm²
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
53 jaar
Etnische afkomst
Japans