
- Tissue
- ערמונית
- Disease
- קרצינומה
- Metastatic site
- בלוטת לימפה על-צלעית שמאלית
- Synonyms
- LNCAP, LNCap, Ln-Cap, Lymph Node Carcinoma of the prostate
Documents
01General information
- Description
תאי LNCaP, שמקורם בנגע גרורתי בבלוטת לימפה של חולה בסרטן הערמונית, מהווים כלי חשוב במחקר סרטן הערמונית, במיוחד לחקר תפקידם של אנדרוגנים ודינמיקת קולטני האנדרוגן (AR) בהתקדמות הסרטן. קו התאים LNCaP מאופיין בצמיחה רגישה לאנדרוגנים ומספק הצצה למנגנונים העומדים בבסיס תגובת סרטן הערמונית למניפולציה הורמונלית.
כמודל לסרטן הערמונית גרורתי, תאי LNCaP ההוריים ותתי-הקווים שלהם, כגון שיבוט LNCaP FGC, מספקים תובנות רלוונטיות קלינית להתקדמות המחלה, במיוחד בהקשר של גרורות לעצמות, היוצרות נגעים אוסטאובלסטיים הדומים לאלה הנצפים בסרטן הערמונית בבני אדם.
קו תאי סרטן הערמונית האנושי LNCaP מבטא צורה מוטציה של הגן AR עם ספציפיות רחבה יותר לקשירת סטרואידים, ולכן הוא חיוני להבנת האינטראקציה המורכבת בין פעילות AR להתקדמות סרטן הערמונית. זה כולל בדיקה של מטרות AR במורד הזרם, כגון PSA ו-NKx3.1, שהן חיוניות לתפקוד תאי האפיתל הערמוני. תאי LNCaP משמשים גם במחקרים על ציטוטוקסיות, כגון אלה המושרות על ידי ripl, או על ההשפעות הטיפוליות הפוטנציאליות של תרכובות כמו אמיגדלין, במסגרת אסטרטגיות להעברת תרופות לתוך התא.
לסיכום, קו תאי קרצינומה של הערמונית האנושית LNCaP משמש אבן דרך בהבנת תפקידם של אנדרוגנים בהתקדמות הסרטן ובסרטן הערמונית, ומספק תובנות לגבי סוגי סרטן המגיבים להורמונים, האתגרים של סרטן הערמונית העמיד והפוטנציאל להתערבויות טיפוליות. קו התאים LNCaP נחשב לאחד מקווי התאים הקלאסיים והנפוצים ביותר של סרטן הערמונית האנושית, לצד תאי DU145 ו-PC3.
- Tissue
- ערמונית
- Disease
- קרצינומה
- Metastatic site
- בלוטת לימפה על-צלעית שמאלית
- Synonyms
- LNCAP
- LNCap
- Ln-Cap
- Lymph Node Carcinoma of the prostate
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים
- Karyotype
- זכר פסאודודיפלואידי, שבעה כרומוזומים סמנים, מספר מודאלי = 46, טווח = 33 עד 91
- Doubling time
- 60 שעות
04Identifiers
- Citation
- LNCaP (מספר קטלוגי Cytion 300265)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0395
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- אנדרוגן, אסטרוגן
- Protein expression
- P53 חיובי
- Products
- פוספטאז חומצי פרוסטטי אנושי, אנטיגן ספציפי לערמונית
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS מנוטרל בחום
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 עד 2 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- כל 3 ימים
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 50 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes

.jpg)
.jpg)