Премини към съдържанието
Клетки LNCaP
Тъкан
Простата
Заболяване
Карцином
Място на метастазите
Ляв супраклавикуларен лимфен възел
Синоними
LNCAP, LNCap, Ln-Cap, Lymph Node Carcinoma of the prostate

Документи

Клетки LNCaP

Cell line · Номер на продукта 300265

Клетките LNCaP, получени от метастатично образувание в лимфен възел на пациент с рак на простатата, представляват изключително важен инструмент в изследванията на рака на простатата, особено...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките LNCaP, получени от метастатична лезия в лимфен възел на пациент с рак на простатата, представляват важен инструмент в изследванията на рака на простатата, особено за изучаване на ролята на андрогените и динамиката на андрогенния рецептор (АР) в прогресията на рака. Клетъчната линия LNCaP се характеризира с андроген-чувствителен растеж и предлага прозорец към механизмите, лежащи в основата на отговора на рака на простатата към хормонални манипулации.

Като модел за метастатичен рак на простатата родителските LNCaP клетки и техните подлинии, като LNCaP клонинга FGC, предоставят клинично значими прозрения за прогресията на заболяването, особено в контекста на метастазите в костите, образувайки остеобластни лезии, подобни на тези, наблюдавани при човешкия рак на простатата.

Клетъчната линия на човешкия рак на простатата LNCaP експресира мутирала форма на гена AR с по-широка специфичност на стероидното свързване и поради това е от ключово значение за разбирането на сложното взаимодействие между активността на AR и прогресията на рака на простатата. Това включва изследване на целите на AR надолу по веригата, като PSA и NKx3.1, които са от решаващо значение за функцията на епителните клетки на простатата. Клетките LNCaP се използват и за изследвания на цитотоксичността, като например тази, предизвикана от ripl, или на потенциалните терапевтични ефекти на съединения като амигдалин, в рамките на стратегиите за вътреклетъчно доставяне на лекарства.

В обобщение, човешката клетъчна линия за карцином на простатата LNCaP служи като крайъгълен камък в разбирането на ролята на андрогените в прогресията на рака и рака на простатата, предлагайки прозрения за хормонореактивните ракови заболявания, предизвикателствата на резистентния рак на простатата и потенциала за терапевтични интервенции. Клетъчната линия LNCaP се счита за една от класическите и най-широко използвани човешки клетъчни линии за рак на простатата, наред с клетките DU145 и PC3.

Тъкан
Простата
Заболяване
Карцином
Място на метастазите
Ляв супраклавикуларен лимфен възел
Синоними
  • LNCAP
  • LNCap
  • Ln-Cap
  • Lymph Node Carcinoma of the prostate

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при голи мишки
Кариотип
Псевдодиплоиден мъжки, седем маркерни хромозоми, модален брой = 46, диапазон = 33 до 91
Време за удвояване
60 часа

04Идентификатори

Източник
LNCaP (каталожен номер 300265 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0395

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Андроген, естроген
Експресия на протеини
P53 положителен
Продукти
Човешка простатна киселинна фосфатаза, простатен специфичен антиген

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с топлинно активиран 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 до 2 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
На всеки 3 дни
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
50 години
Етническа принадлежност
Кавказки