Prejsť na obsah
Bunky LNCaP
Tkanivo
Prostata
Choroba
Karcinóm
Miesto metastáz
Ľavá supraklavikulárna lymfatická uzlina
Synonymá
LNCAP, LNCap, Ln-Cap, Lymph Node Carcinoma of the prostate

Dokumenty

Bunky LNCaP

Cell line · Číslo výrobku 300265

Bunky LNCaP, získané z metastatického ložiska v lymfatickom uzline pacienta s rakovinou prostaty, predstavujú kľúčový nástroj vo výskume rakoviny prostaty, najmä...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky LNCaP získané z metastatického ložiska v lymfatickej uzline pacienta s rakovinou prostaty predstavujú dôležitý nástroj vo výskume rakoviny prostaty, najmä na štúdium úlohy androgénov a dynamiky androgénového receptora (AR) pri progresii rakoviny. Bunkovú líniu LNCaP charakterizuje rast citlivý na androgény a ponúka možnosť nahliadnuť do mechanizmov, ktoré sú základom reakcie rakoviny prostaty na hormonálnu manipuláciu.

Ako model metastatického karcinómu prostaty poskytujú rodičovské bunky LNCaP a ich sublínie, ako napríklad klon LNCaP FGC, klinicky relevantné poznatky o progresii ochorenia, najmä v kontexte metastázovania do kostí, pričom vytvárajú osteoblastické lézie podobné tým, ktoré sa pozorujú u ľudského karcinómu prostaty.

Bunková línia ľudského karcinómu prostaty LNCaP exprimuje mutovanú formu génu AR so širšou špecifickosťou väzby steroidov, a preto je kľúčová pre pochopenie komplexnej interakcie medzi aktivitou AR a progresiou karcinómu prostaty. To zahŕňa skúmanie následných cieľov AR, ako sú PSA a NKx3.1, ktoré sú kľúčové pre funkciu epitelových buniek prostaty. Bunky LNCaP sa ďalej využívajú pri štúdiách cytotoxicity, napríklad vyvolanej riplom, alebo potenciálnych terapeutických účinkov zlúčenín, ako je amygdalín, v rámci stratégií intracelulárneho podávania liečiv.

Celkovo možno konštatovať, že ľudská bunková línia karcinómu prostaty LNCaP slúži ako základný kameň pri pochopení úlohy androgénov v progresii rakoviny a karcinómu prostaty, ponúka pohľad na rakovinu reagujúcu na hormóny, problémy rezistentného karcinómu prostaty a potenciál terapeutických zásahov. Bunková línia LNCaP sa popri bunkách DU145 a PC3 považuje za jednu z klasických a najpoužívanejších bunkových línií ľudského karcinómu prostaty.

Tkanivo
Prostata
Choroba
Karcinóm
Miesto metastáz
Ľavá supraklavikulárna lymfatická uzlina
Synonymá
  • LNCAP
  • LNCap
  • Ln-Cap
  • Lymph Node Carcinoma of the prostate

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach
Karyotyp
Pseudodiploidný samec, sedem markerových chromozómov, modálny počet = 46, rozsah = 33 až 91
Doba zdvojnásobenia
60 hodín

04Identifikátory

Citácia
LNCaP (katalógové číslo Cytion 300265)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0395

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Androgén, estrogén
Expresia proteínov
P53 pozitívny
Produkty
Ľudská prostatická kyslá fosfatáza, prostatický špecifický antigén

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium tepelne aktivovaným 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 2 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
Každé 3 dni
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
50 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský