Přejít na obsah
Buňky LNCaP
Tkáň
Prostata
Nemoc
Karcinom
Místo metastázy
Levá nadklíčková lymfatická uzlina
Synonyma
LNCAP, LNCap, Ln-Cap, Lymph Node Carcinoma of the prostate

Dokumenty

Buňky LNCaP

Cell line · Číslo výrobku 300265

Buňky LNCaP, získané z metastatického ložiska v lymfatické uzlině pacienta s rakovinou prostaty, představují klíčový nástroj ve výzkumu rakoviny prostaty, zejména...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky LNCaP, odvozené z metastatického ložiska v lymfatické uzlině pacienta s karcinomem prostaty, představují důležitý nástroj ve výzkumu karcinomu prostaty, zejména pro studium role androgenů a dynamiky androgenních receptorů (AR) v progresi karcinomu. Buněčná linie LNCaP je charakteristická svým růstem citlivým na androgeny a nabízí okno do mechanismů, které jsou základem reakce karcinomu prostaty na hormonální manipulaci.

Jako model metastazujícího karcinomu prostaty poskytují rodičovské buňky LNCaP a jejich podlinie, jako je klon LNCaP FGC, klinicky relevantní poznatky o progresi onemocnění, zejména v souvislosti s metastázami do kostí, které vytvářejí osteoblastické léze podobné těm, jež jsou pozorovány u lidského karcinomu prostaty.

Buněčná linie lidského karcinomu prostaty LNCaP exprimuje mutovanou formu genu AR s širší specifitou pro vazbu steroidů, a je proto klíčová pro pochopení komplexní interakce mezi aktivitou AR a progresí karcinomu prostaty. To zahrnuje i zkoumání následných cílů AR, jako jsou PSA a NKx3.1, které jsou klíčové pro funkci epiteliálních buněk prostaty. Buňky LNCaP se dále využívají při studiích cytotoxicity, např. vyvolané riplem, nebo potenciálních terapeutických účinků sloučenin, jako je amygdalin, v rámci strategií intracelulárního podávání léčiv.

Souhrnně lze říci, že buněčná linie lidského karcinomu prostaty LNCaP slouží jako základní kámen pro pochopení role androgenů v progresi rakoviny a karcinomu prostaty, nabízí pohled na rakovinu reagující na hormony, problémy rezistentního karcinomu prostaty a možnosti terapeutických zásahů. Buněčná linie LNCaP je vedle buněk DU145 a PC3 považována za jednu z klasických a nejpoužívanějších buněčných linií lidského karcinomu prostaty.

Tkáň
Prostata
Nemoc
Karcinom
Místo metastázy
Levá nadklíčková lymfatická uzlina
Synonyma
  • LNCAP
  • LNCap
  • Ln-Cap
  • Lymph Node Carcinoma of the prostate

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u nahých myší
Karyotyp
Pseudodiploidní samci, sedm markerových chromozomů, modální počet = 46, rozsah = 33 až 91
Doba zdvojnásobení
60 hodin

04Identifikátory

Citace
LNCaP (katalogové číslo Cytion 300265)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0395

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
Androgen, estrogen
Exprese proteinů
P53 pozitivní
Produkty
Lidská prostatická kyselá fosfatáza, prostatický specifický antigen

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium tepelně aktivovaným 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 2 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
Každé 3 dny
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
50 let
Etnická příslušnost
Kavkazský