Přejít na obsah
Buňky DU-145
Tkáň
Prostata
Nemoc
Karcinom
Místo metastázy
Mozek
Synonyma
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

Dokumenty

Buňky DU-145

Cell line · Číslo výrobku 300168

DU145 je lidská buněčná linie rakoviny prostaty s epiteliální morfologií, která se běžně používá ve výzkumu rakoviny prostaty. Tato buněčná linie byla izolována z mozku...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

DU145 je lidská buňka karcinomu prostaty s epiteliální morfologií, která se běžně používá při výzkumu karcinomu prostaty. Tato buněčná linie byla vytvořena z mozku 69letého muže s rakovinou prostaty. Exprimují androgenní receptory a jsou považovány za tumorigenní se středním metastatickým potenciálem, přičemž po injekčním podání nahým myším vytvářejí adenokarcinom (stupeň II) odpovídající primární prostatě.

Z hlediska karyotypu jsou buňky DU145 hypotriploidní a mají několik markerových chromozomů, mimo jiné t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32). Exprimují několik izoenzymů, včetně AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 a PGM3. Buňky však neexprimují prostatický antigen.

Buňky DU145 jsou slabě pozitivní na kyselou fosfatázu a jsou schopny vytvářet kolonie v měkkém agaru. Ultrastrukturálními analýzami byla zjištěna přítomnost mikrovilů, tonofilament, desmosomů, jakýchkoli mitochondrií, dobře vyvinutého Golgiho a heterogenních lysosomů. Buňky DU145 mají dobu zdvojení přibližně 30-40 hodin a jsou vhodnými hostiteli pro transfekci.

Buňky DU145 jsou cenným nástrojem v terapeutickém výzkumu rakoviny prostaty. Spolu s buněčnými liniemi PC3 a LNCaP je DU145 standardní buněčnou linií karcinomu prostaty používanou v lékařském výzkumu. Spolu s buňkami PC-3 exprimují buňky DU-145 proteiny androgenního receptoru. Při ošetření androgenním ligandem však buňky nevykazovaly stimulaci aktivity reportérového genu reagujícího na AR. Proto jsou tyto buňky považovány za buňky nereagující na androgen.

Tkáň
Prostata
Nemoc
Karcinom
Místo metastázy
Mozek
Synonyma
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Formy adenokarcinomu (grade II) odpovídající primárnímu nádoru prostaty
Karyotyp
(P75) hypotriploidní až tetraploidní s abnormalitami včetně zlomů, dicentrik, minut a velkého telocentrického markeru

04Identifikátory

Citace
DU-145 (katalogové číslo Cytion 300168)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Krevní skupina O, Rh+
Isoenzymy
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, produkt fenotypové frekvence: 0.0041

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 x 104 buněk/cm2 vytvoří konfluentní vrstvu za přibližně 4 dny.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení nechte buňky alespoň 24 hodin zotavovat z procesu zmrazování.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
69 let