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- Tissue
- Próstata
- Disease
- Carcinoma
- Metastatic site
- Cerebro
- Synonyms
- DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145
Documents
01General information
- Description
DU145 es una línea celular de cáncer de próstata humano con morfología epitelial que se utiliza comúnmente en la investigación del cáncer de próstata. La línea celular se estableció a partir del cerebro de un hombre de 69 años con cáncer de próstata. Estas células expresan receptores de andrógenos y se consideran tumorigénicas con un potencial metastásico moderado; al inyectarlas en ratones desnudos, forman un adenocarcinoma (grado II) compatible con un tumor primario de próstata.
En cuanto al cariotipo, las células DU145 son hipotriploides y presentan varios cromosomas marcadores, entre ellos t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11) y del(1)(p32), entre otros. Expresan varias isoenzimas, entre ellas AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 y PGM3. Sin embargo, las células no expresan el antígeno prostático.
Las células DU145 son débilmente positivas para la fosfatasa ácida y son capaces de formar colonias en agar blando. Mediante análisis ultraestructurales se ha descrito la presencia de microvellosidades, tonofilamentos, desmosomas, mitocondrias, un aparato de Golgi bien desarrollado y lisosomas heterogéneos. Las células DU145 tienen un tiempo de duplicación de aproximadamente 30 a 40 horas y son huéspedes adecuados para la transfección.
Las células DU145 son una herramienta valiosa en la investigación terapéutica del cáncer de próstata. Junto con las líneas celulares PC3 y LNCaP, la DU145 es una línea celular estándar de cáncer de próstata utilizada en la investigación médica. Al igual que las células PC-3, las células DU-145 expresan proteínas del receptor de andrógenos. Sin embargo, cuando se trataron con un ligando androgénico, las células no mostraron una estimulación de la actividad de un gen reportero sensible al AR. Por lo tanto, se considera que estas células no responden a los andrógenos.
- Tissue
- Próstata
- Disease
- Carcinoma
- Metastatic site
- Cerebro
- Synonyms
- DU145
- Du-145
- DU 145
- DU_145
- DU.145
- Duke University 145
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Tumourigenic
- Se trata de un adenocarcinoma (grado II) compatible con un tumor primario de próstata
- Karyotype
- (P75) de hipotriploide a tetraploide con anomalías que incluyen roturas, dicéntricos, marcadores telocéntricos minúsculos y grandes (es-419)
04Identifiers
- Citation
- DU-145 (número de catálogo de Cytion 300168)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0105
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- Tipo de sangre O, Rh+
- Isoenzymes
- Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Producto de frecuencia fenotípica: 0,0041
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), con: 2 mM de L-glutamina, con: 2,2 g/L de NaHCO₃, con: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS y un 1 % de NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Seeding density
- 2 × 10⁴ células/cm² formarán una capa confluente en unos 4 días
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, deja que las células se recuperen del proceso de congelación durante al menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 69 años
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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