İçeriğe atla
DU-145 Hücreleri
Doku
Prostat
Hastalık
Karsinom
Metastaz yeri
Beyin
Eş anlamlılar
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

DU-145 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300168

DU145, prostat kanseri araştırmalarında yaygın olarak kullanılan, epitelyal morfolojiye sahip bir insan prostat kanseri hücresidir. Bu hücre hattı, beyin...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

DU145, prostat kanseri araştırmalarında yaygın olarak kullanılan epitelyal morfolojiye sahip bir insan prostat kanseri hücresidir. Hücre hattı, prostat kanseri olan 69 yaşındaki bir erkeğin beyninden oluşturulmuştur. Androjen reseptörlerini ifade ederler ve çıplak farelere enjekte edildiklerinde prostatik primer ile uyumlu adenokarsinom (derece II) oluşturarak orta derecede metastatik potansiyele sahip tümörijenik olarak kabul edilirler.

Karyotip açısından DU145 hücreleri hipotriploiddir ve diğerleri arasında t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32) dahil olmak üzere çeşitli işaret kromozomlarına sahiptir. AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 ve PGM3 dahil olmak üzere çeşitli izoenzimleri ifade ederler. Ancak, hücreler prostat antijenini ifade etmez.

DU145 hücreleri asit fosfataz için zayıf pozitiftir ve yumuşak agarda koloniler oluşturabilir. Mikrovilluslar, tonofilamentler, desmozomlar, herhangi bir mitokondri, iyi gelişmiş Golgi ve heterojen lizozomların varlığı ultrastrüktürel analizlerle rapor edilmiştir. DU145 hücreleri yaklaşık 30-40 saatlik bir ikiye katlama süresine sahiptir ve uygun transfeksiyon konakçılarıdır.

DU145 hücreleri prostat kanserinin terapötik araştırmalarında değerli bir araçtır. PC3 ve LNCaP hücre hatları ile birlikte DU145, tıbbi araştırmalarda kullanılan standart bir prostat kanseri hücre hattıdır. PC-3 hücreleri ile birlikte DU-145 hücreleri de androjen reseptör proteinlerini ifade eder. Bununla birlikte, bir androjen ligandı ile muamele edildiğinde, hücreler AR'ye duyarlı bir raportör genin aktivitesinin uyarıldığını göstermemiştir. Bu nedenle, bu hücrelerin androjene yanıt vermediği düşünülmektedir.

Doku
Prostat
Hastalık
Karsinom
Metastaz yeri
Beyin
Eş anlamlılar
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Prostatik primer ile uyumlu adenokarsinom (derece II) oluşturur
Karyotip
(P75) kırılmalar, dikentrikler, dakikalar ve büyük telosentrik işaretleyici gibi anormalliklerle birlikte hipotriploid ila tetraploid

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
DU-145 (Cytion katalog numarası 300168)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
Kan Grubu O, Rh+
İzoenzimler
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Fenotip Frekans Ürünü: 0.0041

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2 x 104 hücre/cm2 yaklaşık 4 gün içinde birleşik bir tabaka oluşturacaktır.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücrelerin en az 24 saat boyunca dondurma işleminden kurtulmasına izin verin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
69 yıl