Ga naar de inhoud
DU-145 Cellen
Weefsel
Prostaat
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Hersenen
Synoniemen
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

Documenten

DU-145 Cellen

Cell line · Productnummer 300168

DU145 is een menselijke prostaatkankercel met een epitheliale morfologie die veel wordt gebruikt in onderzoek naar prostaatkanker. De cellijn is geïsoleerd uit de pr...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

DU145 is een menselijke prostaatkankercel met een epitheliale morfologie die vaak gebruikt wordt in prostaatkankeronderzoek. De cellijn is afkomstig uit de hersenen van een 69-jarige man met prostaatkanker. Ze brengen androgeenreceptoren tot expressie en worden beschouwd als tumorigeen met een matig metastatisch potentieel, waarbij ze een adenocarcinoom (graad II) vormen dat overeenkomt met een primaire prostaat wanneer ze in naaktmuizen worden geïnjecteerd.

In termen van karyotype zijn DU145-cellen hypotriploïde en hebben ze verschillende merkerchromosomen, waaronder t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32). Ze brengen verschillende iso-enzymen tot expressie, waaronder AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 en PGM3. De cellen brengen echter niet het prostaatantigeen tot expressie.

DU145-cellen zijn zwak positief voor zure fosfatase en kunnen kolonies vormen in zachte agar. De aanwezigheid van microvilli, tonofilamenten, desmosomen, enige mitochondriën, goed ontwikkelde Golgi en heterogene lysosomen werd gerapporteerd door middel van ultrastructurele analyses. DU145 cellen hebben een verdubbelingstijd van ongeveer 30-40 uur en zijn geschikte gastheren voor transfectie.

DU145 cellen zijn een waardevol hulpmiddel in het therapeutisch onderzoek naar prostaatkanker. Samen met PC3- en LNCaP-cellijnen is DU145 een standaard prostaatkankercellijn die wordt gebruikt in medisch onderzoek. Net als PC-3-cellen brengen DU-145-cellen androgeenreceptoreiwitten tot expressie. Bij behandeling met een androgeenligand vertoonden de cellen echter geen stimulatie van de activiteit van een AR-responsief reportergen. Daarom worden deze cellen beschouwd als niet androgeenresponsief.

Weefsel
Prostaat
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Hersenen
Synoniemen
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Vormt adenocarcinoom (graad II) consistent met prostaatprimair
Karyotype
(P75) hypotriploïd tot tetraploïd met afwijkingen zoals breuken, dicentrisch, minuten en grote telocentrische marker

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
DU-145 (Cytion catalogusnummer 300168)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
Bloedgroep O, Rh+
Iso-enzymen
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Fenotype Frequentie Product: 0.0041

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2 x 104 cellen/cm2 zullen in ongeveer 4 dagen een confluente laag vormen.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Laat de cellen na het ontdooien minstens 24 uur bijkomen van het vriesproces.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
69 jaar