Cellules DU-145

La lignée cellulaire DU145 est une lignée de cellules cancéreuses de la prostate humaine présentant une morphologie épithéliale, couramment utilisée dans la recherche sur le cancer de la prostate. Cette lignée cellulaire a été établie à partir du cerveau d’un homme de 69 ans atteint d’un cancer de la prostate. Ces cellules expriment des récepteurs androgéniques et sont considérées comme tumorigènes, avec un potentiel métastatique modéré; lorsqu’elles sont injectées à des souris nues, elles forment un adénocarcinome (grade II) correspondant à une tumeur primitive de la prostate.

En ce qui concerne le caryotype, les cellules DU145 sont hypotriploïdes et possèdent plusieurs chromosomes marqueurs, notamment t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11) et del(1)(p32), entre autres. Elles expriment plusieurs isoenzymes, notamment AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 et PGM3. Cependant, ces cellules n’expriment pas l’antigène prostatique.

Les cellules DU145 sont faiblement positives pour la phosphatase acide et capables de former des colonies dans de l’agar mou. Des analyses ultrastructurales ont révélé la présence de microvillosités, de tonofilaments, de desmosomes, de mitochondries, d’un appareil de Golgi bien développé et de lysosomes hétérogènes. Les cellules DU145 ont un temps de doublement d’environ 30 à 40 heures et constituent de bons hôtes pour la transfection.

Les cellules DU145 constituent un outil précieux dans la recherche thérapeutique sur le cancer de la prostate. Avec les lignées cellulaires PC3 et LNCaP, la lignée DU145 est une lignée cellulaire standard du cancer de la prostate utilisée en recherche médicale. Tout comme les cellules PC-3, les cellules DU-145 expriment des protéines réceptrices des androgènes. Cependant, lorsqu’elles sont traitées avec un ligand androgénique, ces cellules ne présentent pas de stimulation de l’activité d’un gène rapporteur sensible à l’AR. Par conséquent, ces cellules sont considérées comme non sensibles aux androgènes.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.