Pereiti prie turinio
DU-145 ląstelės
Audinys
Prostatos
Liga
Karcinoma
Metastazių vieta
Smegenys
Sinonimai
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

Dokumentai

DU-145 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300168

DU145 – tai žmogaus prostatos vėžio ląstelė, pasižyminti epiteline morfologija, dažnai naudojama prostatos vėžio tyrimuose. Ši ląstelių linija buvo išskirta iš prostatos...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

DU145 yra žmogaus prostatos vėžio ląstelė, pasižyminti epitelio morfologija, paprastai naudojama prostatos vėžio tyrimams. Ląstelių linija buvo sukurta iš 69 metų vyro, sergančio prostatos vėžiu, smegenų. Jos išreiškia androgenų receptorius ir yra laikomos tumorigeninėmis, turinčiomis vidutinį metastazavimo potencialą, o įšvirkštos į nuogas peles suformuoja adenokarcinomą (II laipsnio), atitinkančią prostatos pirminę formą.

Pagal kariotipą DU145 ląstelės yra hipotriploidinės ir turi kelias žymėtąsias chromosomas, įskaitant t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32) ir kt. Jie ekspresuoja keletą izofermentų, įskaitant AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 ir PGM3. Tačiau ląstelės neišreiškia prostatos antigeno.

DU145 ląstelės yra silpnai teigiamos rūgštinei fosfatazei ir gali sudaryti kolonijas minkštame agare. Ultrastruktūrinės analizės metu nustatyta, kad yra mikrovilių, tonofilamentų, desmosomų, bet kokių mitochondrijų, gerai išsivysčiusių Golgio ir heterogeninių lizosomų. DU145 ląstelių padvigubėjimo laikas yra maždaug 30-40 valandų, todėl jos yra tinkami transfekcijos šeimininkai.

DU145 ląstelės yra vertingas įrankis prostatos vėžio terapiniams tyrimams. Kartu su PC3 ir LNCaP ląstelių linijomis DU145 yra standartinė prostatos vėžio ląstelių linija, naudojama medicininiuose tyrimuose. Kartu su PC-3 ląstelėmis DU-145 ląstelės ekspresuoja androgenų receptorių baltymus. Tačiau, veikiant androgenų ligandu, ląstelės nerodė į AR reaguojančio reporterio geno aktyvumo stimuliacijos. Todėl šios ląstelės laikomos nereaguojančiomis į androgenus.

Audinys
Prostatos
Liga
Karcinoma
Metastazių vieta
Smegenys
Sinonimai
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Formuojasi adenokarcinoma (II laipsnio), atitinkanti prostatos pirminę formą
Kariotipas
(P75) nuo hipotriploidinio iki tetraploidinio su anomalijomis, įskaitant lūžius, dicentriką, minutes ir didelę telocentrinę žymę

04Identifikatoriai

Nuoroda
DU-145 (Cytion katalogo numeris 300168)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
Kraujo tipas O, Rh+
Izofermentai
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Fenotipo dažnio produktas: 0.0041

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
2 x 104 ląstelės/cm2 per maždaug 4 dienas sudarys konfluentinį sluoksnį.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Po atšildymo leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
69 metai