Mine otse sisu juurde
DU-145 rakud
Kude
Eesnäärme
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Aju
Sünonüümid
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

Dokumendid

DU-145 rakud

Cell line · Toote number 300168

DU145 on epiteelimorfoloogiaga inimese eesnäärmevähi rakk, mida kasutatakse laialdaselt eesnäärmevähi uurimisel. Rakuliin loodi aju...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

DU145 on inimese eesnäärmevähi rakk, millel on epiteliaalne morfoloogia ja mida tavaliselt kasutatakse eesnäärmevähi uuringutes. Rakuliin loodi 69-aastase eesnäärmevähki põdeva mehe ajust. Nad ekspresseerivad androgeeni retseptoreid ja neid peetakse mõõduka metastaatilise potentsiaaliga kasvajateks, moodustades alasti hiirtele süstimisel eesnäärme primaarsele adenokartsinoomile (II aste) vastavat adenokartsinoomi.

Karyotüübi poolest on DU145 rakud hüpotriploidsed ja neil on mitmeid markerkromosoomi, sealhulgas t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32) jt. Nad ekspresseerivad mitmeid isoensüüme, sealhulgas AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 ja PGM3. Siiski ei ekspresseeri rakud eesnäärme antigeeni.

DU145 rakud on happelise fosfataasi suhtes nõrgalt positiivsed ja võimelised moodustama kolooniaid pehmel agaril. Ultrastruktuursete analüüside käigus teatati mikrovillide, tonofilamentide, desmosoomide, mis tahes mitokondrite, hästi arenenud Golgide ja heterogeensete lüsosoomide esinemisest. DU145 rakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 30-40 tundi ja need on sobivad transfektsioonikandjad.

DU145 rakud on väärtuslik vahend eesnäärmevähi terapeutilistes uuringutes. Koos PC3 ja LNCaP rakuliinidega on DU145 standardne eesnäärmevähi rakuliin, mida kasutatakse meditsiinilistes uuringutes. Koos PC-3 rakkudega ekspresseerivad DU-145 rakud androgeeni retseptori valke. Androgeeniligandiga ravimisel ei näidanud rakud siiski AR-le reageeriva reportergeeni aktiivsuse stimuleerimist. Seetõttu peetakse neid rakke androgeenile mittevastavaks.

Kude
Eesnäärme
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Aju
Sünonüümid
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Moodustab adenokartsinoomi (II aste), mis vastab eesnäärme primaarsele seisundile
Karyotüüp
(P75) hüpotriploidne kuni tetraploidne, millel on kõrvalekaldeid, sealhulgas katkestused, ditsentrilised, minutid ja suur telotsentriline marker

04Tunnused

Viide
DU-145 (Cytioni katalooginumber 300168)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Veregrupp O, Rh+
Isoensüümid
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, fenotüübi sageduse toode: 0.0041

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2 moodustavad umbes 4 päeva jooksul konfluentse kihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist laske rakkudel vähemalt 24 tundi külmutamisest taastuda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
69 aastat