.jpg)
- Kude
- Eesnäärme
- Haigus
- Kartsinoom
- Metastaaside asukoht
- Aju
- Sünonüümid
- DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145
Dokumendid
DU-145 rakud
Cell line · Toote number 300168
DU145 on epiteelimorfoloogiaga inimese eesnäärmevähi rakk, mida kasutatakse laialdaselt eesnäärmevähi uurimisel. Rakuliin loodi aju...
Kohandamine / Soovitused
- DU-145 rakudCell line€430.00
01Üldine teave
- Kirjeldus
DU145 on inimese eesnäärmevähi rakk, millel on epiteliaalne morfoloogia ja mida tavaliselt kasutatakse eesnäärmevähi uuringutes. Rakuliin loodi 69-aastase eesnäärmevähki põdeva mehe ajust. Nad ekspresseerivad androgeeni retseptoreid ja neid peetakse mõõduka metastaatilise potentsiaaliga kasvajateks, moodustades alasti hiirtele süstimisel eesnäärme primaarsele adenokartsinoomile (II aste) vastavat adenokartsinoomi.
Karyotüübi poolest on DU145 rakud hüpotriploidsed ja neil on mitmeid markerkromosoomi, sealhulgas t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32) jt. Nad ekspresseerivad mitmeid isoensüüme, sealhulgas AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 ja PGM3. Siiski ei ekspresseeri rakud eesnäärme antigeeni.
DU145 rakud on happelise fosfataasi suhtes nõrgalt positiivsed ja võimelised moodustama kolooniaid pehmel agaril. Ultrastruktuursete analüüside käigus teatati mikrovillide, tonofilamentide, desmosoomide, mis tahes mitokondrite, hästi arenenud Golgide ja heterogeensete lüsosoomide esinemisest. DU145 rakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 30-40 tundi ja need on sobivad transfektsioonikandjad.
DU145 rakud on väärtuslik vahend eesnäärmevähi terapeutilistes uuringutes. Koos PC3 ja LNCaP rakuliinidega on DU145 standardne eesnäärmevähi rakuliin, mida kasutatakse meditsiinilistes uuringutes. Koos PC-3 rakkudega ekspresseerivad DU-145 rakud androgeeni retseptori valke. Androgeeniligandiga ravimisel ei näidanud rakud siiski AR-le reageeriva reportergeeni aktiivsuse stimuleerimist. Seetõttu peetakse neid rakke androgeenile mittevastavaks.
- Kude
- Eesnäärme
- Haigus
- Kartsinoom
- Metastaaside asukoht
- Aju
- Sünonüümid
- DU145
- Du-145
- DU 145
- DU_145
- DU.145
- Duke University 145
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Mees
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Tuumorigeenne
- Moodustab adenokartsinoomi (II aste), mis vastab eesnäärme primaarsele seisundile
- Karyotüüp
- (P75) hüpotriploidne kuni tetraploidne, millel on kõrvalekaldeid, sealhulgas katkestused, ditsentrilised, minutid ja suur telotsentriline marker
04Tunnused
- Viide
- DU-145 (Cytioni katalooginumber 300168)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0105
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Antigeeni ekspressioon
- Veregrupp O, Rh+
- Isoensüümid
- Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, fenotüübi sageduse toode: 0.0041
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- 2 x 104 rakku/cm2 moodustavad umbes 4 päeva jooksul konfluentse kihi.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Taastumine pärast sulamist
- Pärast sulatamist laske rakkudel vähemalt 24 tundi külmutamisest taastuda.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- 69 aastat
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah


.jpg)