Siirry sisältöön
DU-145-solut
Kudos
Eturauhanen
Sairaus
Syöpä
Metastaasikohde
Aivot
Synonyymit
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

Asiakirjat

DU-145-solut

Cell line · Tuotenumero 300168

DU145 on epiteelimorfologiaa omaava ihmisen eturauhassyöpäsolu, jota käytetään yleisesti eturauhassyövän tutkimuksessa. Solulinja on peräisin aivoista...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

DU145 on ihmisen eturauhassyöpäsolu, jolla on epiteelimorfologia ja jota käytetään yleisesti eturauhassyöpätutkimuksissa. Solulinja on peräisin 69-vuotiaan eturauhassyöpää sairastavan miehen aivoista. Solut ilmentävät androgeenireseptoreita, ja niitä pidetään kasvainvaarallisina ja niillä on kohtalainen metastaattinen potentiaali, ja ne muodostavat eturauhasen primaarisen adenokarsinooman (aste II), kun ne ruiskutetaan alasti eläviin hiiriin.

Karyotyypiltään DU145-solut ovat hypotriploideja, ja niillä on useita merkkikromosomeja, muun muassa t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11) ja del(1)(p32). Ne ilmentävät useita isoentsyymejä, kuten AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 ja PGM3. Solut eivät kuitenkaan ilmentä eturauhasen antigeenia.

DU145-solut ovat heikosti positiivisia happofosfataasin suhteen ja kykenevät muodostamaan pesäkkeitä pehmeällä agarilla. Ultrastruktuurianalyyseissä raportoitiin mikrovillien, tonofilamenttien, desmosomien, mahdollisten mitokondrioiden, hyvin kehittyneen Golgin ja heterogeenisten lysosomien esiintyminen. DU145-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 30-40 tuntia, ja ne ovat sopivia transfektio-isäntiä.

DU145-solut ovat arvokas väline eturauhassyövän terapeuttisessa tutkimuksessa. PC3- ja LNCaP-solulinjojen ohella DU145 on lääketutkimuksessa käytetty eturauhassyövän vakiosolulinja. PC-3-solujen ohella DU-145-solut ilmentävät androgeenireseptoriproteiineja. Kun soluja käsiteltiin androgeeniligandilla, ne eivät kuitenkaan osoittaneet AR-reagoivan reportterigeenin aktiivisuuden stimuloitumista. Siksi näitä soluja pidetään androgeenille reagoimattomina.

Kudos
Eturauhanen
Sairaus
Syöpä
Metastaasikohde
Aivot
Synonyymit
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Muodostaa adenokarsinooman (aste II), joka on yhdenmukainen eturauhasen primaarin kanssa
Karyotyyppi
(P75) hypotriploidisesta tetraploidiseen, poikkeavuuksia, kuten katkoksia, disentrisiä, minuutteja ja suuri telosentrinen merkkipaalu

04Tunnisteet

Lähdeviite
DU-145 (Cytionin luettelonumero 300168)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Veriryhmä O, Rh+
Isoentsyymit
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0041

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2 x 104 solua/cm2 tuottaa konfluenttisen kerroksen noin 4 päivässä.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulatuksen jälkeen solujen annetaan toipua pakastusprosessista vähintään 24 tuntia.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
69 vuotta