Gå til innholdet
DU-145-celler
Vev
Prostata
Sykdom
Karsinom
Metastaseområde
Hjerne
Synonymer
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

Dokumenter

DU-145-celler

Cell line · Produktnummer 300168

DU145 er en humant prostatakreftcelle med epitelial morfologi som ofte brukes i forskning på prostatakreft. Cellelinjen ble etablert fra bryst...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

DU145 er en human prostatakreftcelle med epitelmorfologi som ofte brukes i forskning på prostatakreft. Cellelinjen ble etablert fra hjernen til en 69 år gammel mann med prostatakreft. De uttrykker androgenreseptorer og anses som tumorigeniske med moderat metastatisk potensial, og danner adenokarsinom (grad II) som er forenlig med primær prostatakreft når de injiseres i nakne mus.

Når det gjelder karyotype, er DU145-celler hypotriploide og har flere markørkromosomer, blant annet t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11) og del(1)(p32). De uttrykker flere isoenzymer, blant annet AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 og PGM3. Cellene uttrykker imidlertid ikke prostata-antigenet.

DU145-celler er svakt positive for sur fosfatase og er i stand til å danne kolonier i myk agar. Ultrastrukturelle analyser viser tilstedeværelse av mikrovilli, tonofilamenter, desmosomer, mitokondrier, velutviklet Golgi og heterogene lysosomer. DU145-celler har en fordoblingstid på ca. 30-40 timer og egner seg godt som transfeksjonsverter.

DU145-celler er et verdifullt verktøy i den terapeutiske forskningen på prostatakreft. Sammen med PC3- og LNCaP-cellelinjene er DU145 en standard cellelinje for prostatakreft som brukes i medisinsk forskning. I likhet med PC-3-celler uttrykker DU-145-celler androgenreseptorproteiner. Når cellene ble behandlet med en androgenligand, viste de imidlertid ikke stimulering av aktiviteten til et AR-responsivt reportergen. Derfor anses disse cellene for å være androgenresponsive.

Vev
Prostata
Sykdom
Karsinom
Metastaseområde
Hjerne
Synonymer
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Danner adenokarsinom (grad II) forenlig med prostataprimært
Karyotype
(P75) hypotriploid til tetraploid med abnormaliteter, inkludert brudd, diksentrik, minutter og stor telosentrisk markør

04Identifikatorer

Kildehenvisning
DU-145 (Cytion-katalognummer 300168)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
Blodtype O, Rh+
Isoenzymer
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Fenotypefrekvensprodukt: 0.0041

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2 x 104 celler/cm2 vil gi et sammenflytende lag på omtrent 4 dager.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining må du la cellene restituere seg fra fryseprosessen i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
69 år