Tartalomra ugrás
DU-145 sejtek
Szövet
Prosztata
Betegség
Karcinóma
Áttétes hely
Agy
Szinonimák
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

Dokumentumok

DU-145 sejtek

Cell line · Termékszám 300168

A DU145 egy epiteliális morfológiájú emberi prosztatarákos sejtvonal, amelyet gyakran használnak a prosztatarák kutatásában. A sejtvonalat a prosztatából állították elő...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A DU145 egy emberi prosztatarákos sejt, amely epiteliális morfológiával rendelkezik, és amelyet a prosztatarák kutatásában gyakran használnak. A sejtvonalat egy 69 éves prosztatarákos férfi agyából állították elő. A sejtek androgénreceptorokat expresszálnak, és mérsékelt metasztatikus potenciállal rendelkező tumorigénnek minősülnek, és a prosztata primerének megfelelő adenokarcinómát (II. fokozat) képeznek, amikor meztelen egerekbe injektálják őket.

A kariotípust tekintve a DU145 sejtek hipotriploidok és több marker kromoszómával rendelkeznek, többek között t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32). Számos izoenzimet expresszálnak, többek között az AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 és PGM3. A sejtek azonban nem expresszálják a prosztata antigént.

A DU145 sejtek gyengén pozitívak savas foszfatázra és képesek kolóniákat képezni lágy agarban. Az ultrastrukturális elemzések mikrovillák, tonofilamentumok, deszmoszómák, bármilyen mitokondrium, jól fejlett Golgi és heterogén lizoszómák jelenlétéről számoltak be. A DU145 sejtek megduplázódási ideje körülbelül 30-40 óra, és megfelelő transzfekciós gazdatestek.

A DU145 sejtek értékes eszközt jelentenek a prosztatarák terápiás kutatásában. A PC3 és LNCaP sejtvonalakkal együtt a DU145 a gyógyszerkutatásban használt standard prosztatarák sejtvonal. A PC-3 sejtekkel együtt a DU-145 sejtek is expresszálják az androgénreceptor fehérjéket. Androgén ligandummal kezelve azonban a sejtek nem mutatták egy AR-reagáló riporter gén aktivitásának stimulálását. Ezért ezeket a sejteket androgénre nem reagálónak tekintik.

Szövet
Prosztata
Betegség
Karcinóma
Áttétes hely
Agy
Szinonimák
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Adenokarcinóma (II. fokozat), amely megfelel a prosztata primerének
Kariotípus
(P75) hipotriploidtól a tetraploidig, rendellenességekkel, beleértve a töréseket, dicentrikumokat, perceket és nagy telocentrikus markereket is

04Azonosítók

Hivatkozás
DU-145 (Cytion katalógusszám: 300168)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
O vércsoport, Rh+
Izoenzimek
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Phenotype Frequency Product: 0.0041

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
2 x 104 sejt/cm2 körülbelül 4 nap alatt konfluens réteget képez.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
A felolvasztás után hagyja, hogy a sejtek legalább 24 órán át regenerálódjanak a fagyasztás után.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
69 év