Pāriet uz saturu
DU-145 šūnas
Audums
Prostatas
Slimība
Karcinoma
Metastāžu vieta
Smadzenes
Sinonīmi
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

Dokumenti

DU-145 šūnas

Cell line · Preces numurs 300168

DU145 ir cilvēka prostatas vēža šūna ar epitēlija morfoloģiju, ko bieži izmanto prostatas vēža pētījumos. Šūnu līnija tika izveidota no smadzenēm...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

DU145 ir cilvēka prostatas vēža šūna ar epitēlija morfoloģiju, ko parasti izmanto prostatas vēža pētījumos. Šūnu līnija tika iegūta no 69 gadus veca vīrieša smadzenēm, kuram bija prostatas vēzis. Tās ekspresē androgēnu receptorus un tiek uzskatītas par tumorigēnām ar mērenu metastātisku potenciālu, veidojot adenokarcinomu (II pakāpes), kas atbilst prostatas primārajai, kad tās injicē nude pelēm.

Kariatotipa ziņā DU145 šūnas ir hipotriploīdas, un tām ir vairākas marķieru hromosomas, tostarp t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32) un citas. Tie ekspresē vairākus izoenzīmus, tostarp AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 un PGM3. Tomēr šūnas neekspresē prostatas antigēnu.

DU145 šūnas ir vāji pozitīvas skābās fosfatāzes noteikšanai un spēj veidot kolonijas mīkstajā agārā. Ultrastrukturālās analīzēs tika konstatēts, ka šūnās ir mikrovilas, tonofilamenti, desmosomas, mitohondriji, labi attīstīti Golgi un heterogēnas lizosomas. DU145 šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 30-40 stundas, un tās ir piemērotas transfekcijas saimnieces.

DU145 šūnas ir vērtīgs instruments prostatas vēža terapeitiskajos pētījumos. Kopā ar PC3 un LNCaP šūnu līnijām DU145 ir standarta prostatas vēža šūnu līnija, ko izmanto medicīnas pētījumos. DU-145 šūnas kopā ar PC-3 šūnām ekspresē androgēnu receptoru proteīnus. Tomēr, kad šūnas tika apstrādātas ar androgēnu ligandu, tās neuzrādīja AR reaģējošā reportiera gēna aktivitātes stimulāciju. Tāpēc šīs šūnas tiek uzskatītas par uz androgēniem nereaģējošām.

Audums
Prostatas
Slimība
Karcinoma
Metastāžu vieta
Smadzenes
Sinonīmi
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Veido adenokarcinomu (II pakāpes), kas atbilst prostatas primārajai formai
Kariotips
(P75) hipotriploīds līdz tetraploīds ar anomālijām, tostarp pārrāvumiem, dicentriķiem, minūtēm un lielu telocentrisku marķieri

04Identifikatori

Atsauce
DU-145 (Cytion kataloga numurs 300168)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
O asinsgrupa, Rh+
Izoenzīmi
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Fenotipu biežuma produkts: 0.0041

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2 x 104 šūnas/cm2 veidos konfluentu slāni apmēram 4 dienu laikā.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas ļaujiet šūnām vismaz 24 stundas atgūties no sasaldēšanas procesa.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
69 gadi