Pāriet uz saturu
PC3
Audums
Prostatas
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Bone
Sinonīmi
PC-3, PC.3

Dokumenti

PC3

Cell line · Preces numurs 300312

PC3 cells, derived from the bone metastasis in a 62-year-old Caucasian male with grade IV prostatic adenocarcinoma, are a cornerstone in the study of huma...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

PC3 šūnas, kas iegūtas no kaulu metastāzēm 62 gadus vecam kaukāzietim ar IV pakāpes prostatas adenokarcinomu, ir stūrakmens cilvēka prostatas karcinomas izpētē. PC-3 cilvēka prostatas vēža šūnu līniju plaši izmanto prostatas vēža molekulāro un šūnu aspektu izpētei, īpaši saistībā ar metastātisku slimību. To augstais metastatiskais potenciāls padara tās par vērtīgu modeli progresīvu prostatas vēža pētījumu veikšanai.

Tā kā PC3 šūnas ir epitēlija šūnas, tās nereaģē uz androgēniem un nav atkarīgas no tipiskiem augšanas faktoriem, piemēram, glikokortikoīdiem vai fibroblastu augšanas faktoriem, tāpēc tās ir unikālas starp cilvēka prostatas karcinomas šūnām, lai pētītu koenimbīna un citu potenciālo terapeitisko līdzekļu ietekmi.

Prostatas specifiskā antigēna (PSA) ekspresijas trūkums un zema testosterona-5-alfa reduktāzes un skābās fosfatāzes aktivitāte atšķir PC3 no citiem prostatas vēža šūnu modeļiem, piemēram, LNCaP un DU145, no kuriem pirmais ir pazīstams ar luminālo diferenciācijas marķieru, piemēram, AR un PSA, ekspresiju, bet otrais - ar mērenu prostatas karcinomas metastātisko potenciālu.

Turklāt PC3 prostatas karcinomas šūnu līnijas nozīmi prostatas vēža cilmes šūnu pētniecībā uzsver novērojums, ka tās apakšgrupa veido vēža cilmes šūnu holoklonus. Šī īpašība padara PC3 šūnu līniju par kritiski svarīgu modeli audzēja vides izpētei, jo īpaši izmantojot ksenogrāfta modeļus, kur PC3 ksenogrāfta audzēji tiek izmantoti, lai pētītu audzēja augšanu un reakciju uz terapiju in vivo.

Kopsavilkumā PC3 šūnas, kuru izcelsme ir IV pakāpes prostatas adenokarcinoma, kalpo kā galvenais modelis prostatas vēža pētījumos, jo tām ir augsts metastātisks potenciāls, unikāla neatkarība no androgēniem un atšķirīgas šūnu īpašības. To daudzpusība aptver gan metastāžu molekulāros pētījumus, gan terapeitiskās atbildes reakcijas izpēti un prostatas vēža cilmes šūnu izpēti, padarot tās par nenovērtējamu resursu, lai uzlabotu mūsu izpratni par prostatas karcinomas sarežģītību un potenciālo ārstēšanu.

Audums
Prostatas
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Bone
Pieteikumi
Transfekcijas saimnieks
Sinonīmi
  • PC-3
  • PC.3

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm
Kariotips
PC3 šūnu kariotips atšķiras ar to, ka tās ir triploīdas un satur vairākas hromosomu anomālijas, kas veicina to agresīvo raksturu.
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
40 stundas

04Identifikatori

Atsauce
PC3 (Cytion kataloga numurs 300312)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0035

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
HLA A1, A9

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 5% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
Sāciet ar 3 x 104 šūnām/cm2. Pēc šūnu atjaunošanās izmantojiet sēšanas blīvumu 1 x 104 šūnas/cm2 turpmākajiem sadalīšanas posmiem.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
62 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis