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PC3
Tessuto
Prostata
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Osso
Sinonimi
PC-3, PC.3

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PC3

Cell line · Codice prodotto 300312

PC3 cells, derived from the bone metastasis in a 62-year-old Caucasian male with grade IV prostatic adenocarcinoma, are a cornerstone in the study of huma...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule PC3, derivate dalle metastasi ossee di un uomo caucasico di 62 anni con adenocarcinoma prostatico di grado IV, sono una pietra miliare nello studio del carcinoma prostatico umano. La linea cellulare di carcinoma prostatico umano PC-3 è ampiamente utilizzata per studiare gli aspetti molecolari e cellulari del cancro alla prostata, soprattutto nel contesto della malattia metastatica. Il loro elevato potenziale metastatico le rende un modello prezioso per la ricerca avanzata sul cancro alla prostata.

In quanto cellule epiteliali, la mancanza di risposta delle cellule PC3 agli androgeni e la loro indipendenza da fattori di crescita tipici come i glucocorticoidi o i fattori di crescita dei fibroblasti le rendono uniche tra le cellule di carcinoma prostatico umano per lo studio dell'impatto della koenimbina e di altri potenziali agenti terapeutici.

L'assenza di espressione dell'antigene prostatico specifico (PSA) e le basse attività della testosterone-5-alfa reduttasi e della fosfatasi acida distinguono le PC3 da altri modelli cellulari di carcinoma prostatico come LNCaP e DU145, il primo noto per l'espressione di marcatori di differenziazione luminale come AR e PSA e il secondo che rappresenta un potenziale metastatico moderato del carcinoma prostatico.

Inoltre, il ruolo della linea cellulare di carcinoma prostatico PC3 nella ricerca sulle cellule staminali del cancro alla prostata è sottolineato dall'osservazione che un sottoinsieme forma olocloni di cellule staminali del cancro. Questa caratteristica rende la linea cellulare PC3 un modello critico per lo studio dell'ambiente tumorale, in particolare attraverso modelli xenotrapianto in cui i tumori xenotrapianto PC3 sono utilizzati per studiare la crescita tumorale e la risposta alle terapie in vivo.

In sintesi, le cellule PC3, originate da un adenocarcinoma prostatico di grado IV, rappresentano un modello fondamentale nella ricerca sul cancro alla prostata grazie al loro elevato potenziale metastatico, all'esclusiva indipendenza dagli androgeni e alle loro distinte caratteristiche cellulari. La loro versatilità si estende dagli studi molecolari sulle metastasi all'esplorazione delle risposte terapeutiche e all'indagine sulle cellule staminali del cancro alla prostata, rendendole una risorsa inestimabile per far progredire la nostra comprensione delle complessità del carcinoma prostatico e dei potenziali trattamenti.

Tessuto
Prostata
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Osso
Applicazioni
Ospite di trasfezione
Sinonimi
  • PC-3
  • PC.3

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente e in sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi
Cariotipo
Il cariotipo delle cellule PC3 è notevole per essere triploide e contiene anomalie cromosomiche multiple che contribuiscono alla loro natura aggressiva.
Tempo di raddoppio
40 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
PC3 (numero di catalogo Cytion 300312)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0035

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
HLA A1, A9

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 5% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Iniziare con 3 x 104 cellule/cm2. Dopo il recupero delle cellule, utilizzare una densità di semina di 1 x 104 cellule/cm2 per le successive fasi di divisione.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
62 anni
Etnia
Caucasico