Gå direkt till innehållet
DU-145-celler
Vävnad
Prostata
Sjukdom
Carcinom
Metastaseringsställe
Hjärna
Synonymer
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

DU-145-celler

Cell line · Produktnummer 300168

DU145 är en mänsklig prostatacancercell med epitelial morfologi som ofta används inom forskningen om prostatacancer. Cellinjen etablerades från bröst...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

DU145 är en human prostatacancercell med epitelial morfologi som ofta används inom prostatacancerforskning. Cellinjen etablerades från hjärnan hos en 69-årig man med prostatacancer. De uttrycker androgenreceptorer och anses vara tumörframkallande med måttlig metastatisk potential och bildar adenokarcinom (grad II) som överensstämmer med primär prostata när de injiceras i nakenmöss.

När det gäller karyotyp är DU145-celler hypotriploida och har flera markörkromosomer, bland annat t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32). De uttrycker flera isoenzymer, bland annat AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 och PGM3. Cellerna uttrycker dock inte prostataantigenet.

DU145-cellerna är svagt positiva för surt fosfatas och kan bilda kolonier i mjuk agar. Förekomsten av mikrovilli, tonofilament, desmosomer, eventuella mitokondrier, välutvecklad Golgi och heterogena lysosomer rapporterades genom ultrastrukturella analyser. DU145-celler har en fördubblingstid på cirka 30-40 timmar och är lämpliga transfektionsvärdar.

DU145-celler är ett värdefullt verktyg i den terapeutiska forskningen kring prostatacancer. Tillsammans med PC3- och LNCaP-cellinjerna är DU145 en standardcellinje för prostatacancer som används inom medicinsk forskning. I likhet med PC-3-celler uttrycker DU-145-celler androgenreceptorproteiner. När cellerna behandlades med en androgenligand visade de emellertid ingen stimulering av aktiviteten hos en AR-responsiv reportergen. Därför anses dessa celler inte vara androgenresponsiva.

Vävnad
Prostata
Sjukdom
Carcinom
Metastaseringsställe
Hjärna
Synonymer
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Tumörframkallande
Bildar adenokarcinom (grad II) som överensstämmer med primärprostatan
Karyotyp
(P75) hypotriploid till tetraploid med abnormiteter, bl.a. avbrott, dikentriskt, minuter och stor telocentrisk markör

04Identifierare

Källa
DU-145 (Cytion katalognummer 300168)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Uttryck och mottaglighet

Antigenuttryck
Blodgrupp O, Rh+
Isoenzymer
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Fenotyp Frekvens Produkt: 0.0041

06Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
2 x 104 celler/cm2 ger ett konfluent skikt på cirka 4 dagar.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Låt cellerna återhämta sig från frysprocessen i minst 24 timmar efter upptiningen.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
69 år