Перейти до вмісту
Комірки DU-145
Тканина
Простата
Хвороба
Карцинома
Місце метастазування
Мозок
Синоніми
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

Документи

Комірки DU-145

Cell line · Номер товару 300168

DU145 — це клітинна лінія раку простати людини з епітеліальною морфологією, яка широко використовується в дослідженнях раку простати. Ця клітинна лінія була отримана з...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

DU145 - це клітини раку передміхурової залози людини з епітеліальною морфологією, яка зазвичай використовується в дослідженнях раку передміхурової залози. Клітинну лінію було отримано з мозку 69-річного чоловіка, хворого на рак простати. Вони експресують андрогенні рецептори і вважаються пухлинними з помірним метастатичним потенціалом, утворюючи аденокарциному (II ступеня), що відповідає первинному раку передміхурової залози, при введенні голим мишам.

За каріотипом клітини DU145 є гіпотриплоїдними і мають кілька маркерних хромосом, включаючи t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32), серед інших. Вони експресують кілька ізоферментів, включаючи AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 і PGM3. Однак клітини не експресують антиген простати.

Клітини DU145 слабо позитивно реагують на кислу фосфатазу і здатні утворювати колонії на м'якому агарі. Ультраструктурний аналіз показав наявність мікроворсинок, тонофіламентів, десмосом, мітохондрій, добре розвинених Гольджі та гетерогенних лізосом. Клітини DU145 мають час подвоєння приблизно 30-40 годин і є придатними для трансфекції.

Клітини DU145 є цінним інструментом у терапевтичних дослідженнях раку простати. Поряд з клітинними лініями PC3 і LNCaP, DU145 є стандартною клітинною лінією раку передміхурової залози, що використовується в медичних дослідженнях. Як і клітини PC-3, клітини DU-145 експресують білки-рецептори андрогенів. Однак при обробці андрогенним лігандом клітини не виявляли стимуляції активності АР-репортерного гена, що реагує на андрогени. Тому ці клітини вважаються андроген-нечутливими.

Тканина
Простата
Хвороба
Карцинома
Місце метастазування
Мозок
Синоніми
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
Форми аденокарциноми (ступінь II), що відповідає первинному раку передміхурової залози
Каріотип
(P75) гіпотриплоїдний до тетраплоїдного з аномаліями, включаючи розриви, дицентрики, хвилини та великий телецентричний маркер

04Ідентифікатори

Посилання
DU-145 (каталожний номер 300168)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0105

05Експресія та сприйнятливість

Експресія антигену
Група крові O, Rh+
Ізоферменти
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Phenotype Frequency Product: 0.0041

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
2 x 104 клітин/см2 утворять злитий шар приблизно за 4 дні.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування дайте клітинам відновитися після процесу заморожування протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
69 років