Skip to content
เซลล์ DU-145
Tissue
ต่อมลูกหมาก
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Metastatic site
สมอง
Synonyms
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

Documents

เซลล์ DU-145

Cell line · Product number 300168

DU145 is a human prostate cancer cell with an epithelial morphology commonly used in prostate cancer research. The cell line was established from the brai...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

DU145 เป็นเซลล์มะเร็งต่อมลูกหมากของมนุษย์ที่มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบเยื่อบุผิว ซึ่งมักใช้ในการวิจัยมะเร็งต่อมลูกหมาก สายพันธุ์นี้ถูกสร้างขึ้นจากสมองของชายอายุ 69 ปีที่เป็นมะเร็งต่อมลูกหมาก เซลล์นี้แสดงตัวรับแอนโดรเจนและถือว่าเป็นเซลล์ที่สามารถก่อเนื้องอกได้ โดยมีศักยภาพในการแพร่กระจายในระดับปานกลาง และสามารถก่อให้เกิดอะดีโนคาร์ซิโนมา (ระดับ II) ที่สอดคล้องกับมะเร็งต่อมลูกหมากปฐมภูมิเมื่อฉีดเข้าสู่หนูเมาส์ที่ไม่มีภูมิคุ้มกัน

ในแง่ของโครโมโซมแบบคาร์โยไทป์ เซลล์ DU145 เป็นเซลล์ที่มีโครโมโซมเกินปกติ (hypotriploid) และมีโครโมโซมเครื่องหมายหลายตัว รวมถึง t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32) และอื่นๆพวกเขาแสดงไอโซเอนไซม์หลายชนิด รวมถึง AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 และ PGM3 อย่างไรก็ตาม เซลล์เหล่านี้ไม่แสดงแอนติเจนของต่อมลูกหมาก

เซลล์ DU145 ให้ผลบวกอ่อนต่อเอนไซม์แอซิดฟอสฟาเต และมีศักยภาพในการสร้างโคโลนีในวุ้นอ่อน พบไมโครวิลไล โตโนฟิลเมนต์ เดสโมโซม ไมโทคอนเดรีย (หากมี) โกลจิที่พัฒนาดี และไลโซโซมที่มีความหลากหลาย จากการวิเคราะห์โครงสร้างระดับจุลภาค พบว่าเซลล์ DU145 มีเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าประมาณ 30-40 ชั่วโมง และเหมาะสำหรับการทรานส์เฟคชัน

เซลล์ DU145 เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการวิจัยเชิงบำบัดของมะเร็งต่อมลูกหมาก ร่วมกับสายเซลล์ PC3 และ LNCaP เซลล์ DU145 เป็นสายเซลล์มะเร็งต่อมลูกหมากมาตรฐานที่ใช้ในการวิจัยทางยา ร่วมกับเซลล์ PC-3 เซลล์ DU-145 แสดงโปรตีนตัวรับแอนโดรเจน อย่างไรก็ตาม เมื่อถูกบำบัดด้วยแอนโดรเจนลิแกนด์ เซลล์ไม่แสดงการกระตุ้นกิจกรรมของยีนรีพอร์ตเตอร์ที่ตอบสนองต่อ ARดังนั้น เซลล์เหล่านี้จึงถือว่าไม่ตอบสนองต่อแอนโดรเจน

Tissue
ต่อมลูกหมาก
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Metastatic site
สมอง
Synonyms
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
เป็นมะเร็งชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา (ระดับ II) ที่สอดคล้องกับมะเร็งต่อมลูกหมากปฐมภูมิ
Karyotype
(P75) มีจำนวนโครโมโซม 3 ชุดถึง 4 ชุดผิดปกติ รวมถึงการขาดหาย การมีโครโมโซมสองแขน การมีโครโมโซมที่มีแขนเดียว และการมีเครื่องหมายเทโลเซนทริกขนาดเล็กและขนาดใหญ่

04Identifiers

Citation
DU-145 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300168)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Expression and susceptibility

Antigen expression
กรุ๊ปเลือด โอ, Rh+
Isoenzymes
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, ความถี่ของฟีโนไทป์: 0.0041

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2 x 104 เซลล์/cm2 จะให้ชั้นเซลล์ที่หนาแน่นสมบูรณ์ภายในประมาณ 4 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
69 ปี