Preskoči na vsebino
Celice DU-145
Tkivo
Prostata
Bolezen
Karcinom
Mesto metastaze
Možgani
Sinonimi
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

Dokumenti

Celice DU-145

Cell line · Številka izdelka 300168

DU145 je človeška celica raka prostate z epitelijsko morfologijo, ki se pogosto uporablja v raziskavah raka prostate. Celična linija je bila vzpostavljena iz možganov...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

DU145 je človeška celica raka prostate z epitelijsko morfologijo, ki se pogosto uporablja pri raziskavah raka prostate. Celična linija je bila pridobljena iz možganov 69-letnega moškega z rakom prostate. Izražajo androgene receptorje in veljajo za tumorigene z zmernim metastatskim potencialom, pri čemer ob injiciranju v gole miši tvorijo adenokarcinom (stopnje II), ki ustreza primarni prostati.

Kariotipsko so celice DU145 hipotriploidne in imajo več označevalnih kromosomov, med drugim t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32). Izražajo več izoencimov, vključno z AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 in PGM3. Vendar celice ne izražajo prostatičnega antigena.

Celice DU145 so šibko pozitivne na kislo fosfatazo in lahko tvorijo kolonije v mehkem agarju. Z ultrastrukturnimi analizami je bila ugotovljena prisotnost mikrovilov, tonofilamentov, desmosomov, mitohondrijev, dobro razvitih Golgijevih celic in heterogenih lizosomov. Celice DU145 imajo čas podvojitve približno 30-40 ur in so primerni gostitelji za transfekcijo.

Celice DU145 so dragoceno orodje za terapevtske raziskave raka prostate. Poleg celičnih linij PC3 in LNCaP je DU145 standardna celična linija raka prostate, ki se uporablja v medicinskih raziskavah. Poleg celic PC-3 celice DU-145 izražajo beljakovine androgenih receptorjev. Vendar pa celice, ki so bile obdelane z androgenim ligandom, niso pokazale stimulacije aktivnosti reporterskega gena, ki se odziva na AR. Zato se te celice štejejo za celice, ki niso odzivne na androgene.

Tkivo
Prostata
Bolezen
Karcinom
Mesto metastaze
Možgani
Sinonimi
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Forme adenokarcinoma (razred II), ki ustrezajo primarni obliki prostate
Kariotip
(P75) hipotriploidni do tetraploidni z nepravilnostmi, vključno s prekinitvami, dicentriki, minutami in velikim telocentričnim označevalcem

04Identifikatorji

Navajanje vira
DU-145 (kataloška številka Cytion 300168)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
Krvna skupina O, Rh+
Izoenzimi
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Fenotip Pogostost izdelka: 0.0041

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
2 x 104 celic/cm2 bo v približno 4 dneh tvorilo konfluentno plast.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrznitvi pustite celice, da si opomorejo od postopka zamrzovanja vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
69 let