Células DU-145

A DU145 é uma linha celular de câncer de próstata humano com morfologia epitelial, comumente utilizada em pesquisas sobre o câncer de próstata. A linhagem celular foi estabelecida a partir do cérebro de um homem de 69 anos com câncer de próstata. Essas células expressam receptores de andrógenos e são consideradas tumorigênicas, com potencial metastático moderado, formando adenocarcinoma (grau II) compatível com tumor primário da próstata quando injetadas em camundongos nude.

Em termos de cariótipo, as células DU145 são hipotriploides e apresentam vários cromossomos marcadores, incluindo t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32), entre outros. Elas expressam várias isoenzimas, incluindo AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 e PGM3. No entanto, as células não expressam o antígeno prostático.

As células DU145 apresentam reação fracamente positiva para a fosfatase ácida e são capazes de formar colônias em ágar mole. Análises ultraestruturais relataram a presença de microvilosidades, tonofilamentos, desmossomos, mitocôndrias, aparelho de Golgi bem desenvolvido e lisossomos heterogêneos. As células DU145 têm um tempo de duplicação de aproximadamente 30 a 40 horas e são hospedeiras adequadas para transfecção.

As células DU145 são uma ferramenta valiosa na pesquisa terapêutica do câncer de próstata. Juntamente com as linhagens celulares PC3 e LNCaP, a DU145 é uma linhagem celular padrão do câncer de próstata utilizada na pesquisa médica. Assim como as células PC-3, as células DU-145 expressam proteínas do receptor de andrógeno. No entanto, quando tratadas com um ligante androgênico, as células não apresentaram estimulação da atividade de um gene repórter sensível ao AR. Portanto, essas células são consideradas não responsivas aos andrógenos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.