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DU-145-Zellen
Gewebe
Prostata
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Gehirn
Synonyme
DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, Duke University 145

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DU-145-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300168

DU145 ist eine menschliche Prostatakrebszelle mit epithelialer Morphologie, die häufig in der Prostatakrebsforschung verwendet wird. Die Zelllinie wurde aus dem Gehirn…

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

DU145 ist eine menschliche Prostatakrebszelle mit epithelialer Morphologie, die häufig in der Prostatakrebsforschung verwendet wird. Die Zelllinie wurde aus dem Gehirn eines 69-jährigen Mannes mit Prostatakrebs gewonnen. Sie exprimieren Androgenrezeptoren und gelten als tumorigen mit mäßigem Metastasierungspotenzial, wobei sie bei der Injektion in Nacktmäuse ein Adenokarzinom (Grad II) bilden, das dem primären Prostatakarzinom entspricht.

Was den Karyotyp betrifft, so sind DU145-Zellen hypotriploid und weisen mehrere Markerchromosomen auf, darunter t(11q12q), del(11)(q23), 16q+, del(9)(p11), del(1)(p32) und andere. Sie exprimieren mehrere Isoenzyme, darunter AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 und PGM3. Die Zellen exprimieren jedoch nicht das Prostata-Antigen.

DU145-Zellen sind schwach positiv für saure Phosphatase und in der Lage, Kolonien in weichem Agar zu bilden. Ultrastrukturelle Analysen ergaben das Vorhandensein von Mikrovilli, Tonofilamenten, Desmosomen, Mitochondrien, gut ausgebildeten Golgi und heterogenen Lysosomen. DU145-Zellen haben eine Verdopplungszeit von ca. 30-40 Stunden und sind als Transfektionswirte geeignet.

DU145-Zellen sind ein wertvolles Instrument für die therapeutische Forschung bei Prostatakrebs. Zusammen mit den Zelllinien PC3 und LNCaP ist DU145 eine Standard-Prostatakrebs-Zelllinie, die in der medizinischen Forschung verwendet wird. Wie PC-3-Zellen exprimieren auch DU-145-Zellen Androgenrezeptorproteine. Bei Behandlung mit einem Androgenliganden zeigten die Zellen jedoch keine Stimulierung der Aktivität eines AR-responsiven Reportergens. Daher gelten diese Zellen als nicht auf Androgene ansprechend.

Gewebe
Prostata
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Gehirn
Synonyme
  • DU145
  • Du-145
  • DU 145
  • DU_145
  • DU.145
  • Duke University 145

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Bildet ein Adenokarzinom (Grad II), das mit dem primären Prostatakarzinom übereinstimmt
Karyotyp
(P75) hypotriploid bis tetraploid mit Anomalien wie Brüchen, Dizentren, Minuten und großen telozentrischen Markern

04Bezeichner

Quellenangabe
DU-145 (Cytion Katalognummer 300168)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0105

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
Blutgruppe O, Rh+
Isoenzyme
Me-2, 1-2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0041

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
2 x 104 Zellen/cm² ergeben in etwa 4 Tagen eine konfluente Schicht.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Lassen Sie die Zellen nach dem Auftauen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
69 Jahre