Mine otse sisu juurde
LNCaP rakud
Kude
Eesnäärme
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Vasakpoolne supraklavikulaarne lümfisõlm
Sünonüümid
LNCAP, LNCap, Ln-Cap, Lymph Node Carcinoma of the prostate

Dokumendid

LNCaP rakud

Cell line · Toote number 300265

LNCaP-rakud, mis on saadud eesnäärmevähi patsiendi lümfisõlme metastaasist, on eesnäärmevähi uurimisel oluline vahend, eriti...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LNCaP-rakud, mis on saadud eesnäärmevähi patsiendi lümfisõlme metastaatilisest kahjustusest, on eesnäärmevähi uurimisel kriitiline vahend, eriti androgeenide ja androgeeni retseptori (AR) dünaamika rolli uurimiseks vähi progresseerumisel. LNCaP rakuliini iseloomustab androgeenitundlik kasv ja see annab ülevaate mehhanismidest, mis on aluseks eesnäärmevähi reaktsioonile hormonaalsele manipuleerimisele.

Metastaatilise eesnäärmevähi mudelina pakuvad LNCaP vanemrakud ja nende alamliinid, nagu LNCaP kloon FGC, kliiniliselt asjakohast teavet haiguse progresseerumise kohta, eriti seoses metastaaside tekkimisega luudesse, moodustades osteoblastilisi kahjustusi, mis sarnanevad inimese eesnäärmevähi puhul täheldatud kahjustustega.

Inimese eesnäärmevähi LNCaP rakuliin ekspresseerib AR-geeni mutatsioonivormi, millel on laiem steroidide sidumise spetsiifilisus, ja seetõttu on see AR-aktiivsuse ja eesnäärmevähi progresseerumise vahelise keerulise koostoime mõistmisel keskse tähtsusega. See hõlmab AR-i allavoolu sihtmärkide, nagu PSA ja NKx3.1, uurimist, mis on olulised eesnäärme epiteelirakkude toimimiseks. LNCaP rakke kasutatakse ka tsütotoksilisuse uuringutes, näiteks ripl'i poolt indutseeritud uuringutes või selliste ühendite nagu amügdaliin potentsiaalsete terapeutiliste mõjude uurimisel rakusiseste ravimite manustamisstrateegiate raames.

Kokkuvõttes on inimese eesnäärmekartsinoomi rakuliin LNCaP nurgakivi androgeenide rolli mõistmisel vähi progresseerumises ja eesnäärmevähis, pakkudes teadmisi hormoonidele reageerivate vähivormide, resistentse eesnäärmevähi probleemide ja terapeutiliste sekkumiste võimaluste kohta. LNCaP rakuliini peetakse DU145 ja PC3 rakkude kõrval üheks klassikaliseks ja kõige laialdasemalt kasutatavaks inimese eesnäärmevähi rakuliiniks.

Kude
Eesnäärme
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Vasakpoolne supraklavikulaarne lümfisõlm
Sünonüümid
  • LNCAP
  • LNCap
  • Ln-Cap
  • Lymph Node Carcinoma of the prostate

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel
Karyotüüp
Pseudodiploidne isasloom, seitse markerkromosoomi, modaalne arv = 46, vahemik = 33 kuni 91
Kahekordistumisaeg
60 tundi

04Tunnused

Viide
LNCaP (Cytioni katalooginumber 300265)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0395

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Androgeen, östrogeen
Valgu ekspressioon
P53 positiivne
Tooted
Inimese eesnäärme happeline fosfataas, eesnäärme spetsiifiline antigeen

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendatakse keskkonda kuumuseliselt inaktiveeritud 10% FBS-iga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 2 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Iga 3 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
50 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia