Ga naar de inhoud
LNCaP-cellen
Weefsel
Prostaat
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Linker supraclaviculaire lymfeklier
Synoniemen
LNCAP, LNCap, Ln-Cap, Lymph Node Carcinoma of the prostate

Documenten

LNCaP-cellen

Cell line · Productnummer 300265

LNCaP-cellen, afkomstig van een metastatische laesie in een lymfeklier van een prostaatkankerpatiënt, vormen een essentieel hulpmiddel bij het onderzoek naar prostaatkanker, met name...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

LNCaP cellen, afkomstig van een metastatische laesie in een lymfeklier van een prostaatkankerpatiënt, vormen een cruciaal instrument in prostaatkankeronderzoek, met name voor het bestuderen van de rol van androgenen en androgeen receptordynamica (AR) in kankerprogressie. De LNCaP-cellijn wordt gekenmerkt door hun androgeengevoelige groei en biedt een venster op de mechanismen die ten grondslag liggen aan de reactie van prostaatkanker op hormonale manipulatie.

Als model voor uitgezaaide prostaatkanker bieden ouderlijke LNCaP-cellen en hun sublijnen, zoals de LNCaP-kloon FGC, klinisch relevante inzichten in ziekteprogressie, vooral in de context van metastase naar bot, waarbij osteoblastische laesies worden gevormd die verwant zijn aan de laesies die worden waargenomen bij humane prostaatkanker.

De LNCaP humane prostaatkanker cellijn brengt een gemuteerde vorm van het AR gen tot expressie met een bredere steroid-bindende specificiteit en is daarom cruciaal voor het begrijpen van de complexe interactie tussen AR activiteit en prostaatkanker progressie. Dit omvat het onderzoek van AR-downstream targets zoals PSA en NKx3.1, die cruciaal zijn voor de functie van prostaatepitheelcellen. LNCaP cellen worden verder gebruikt in cytotoxiciteitsstudies zoals die geïnduceerd door ripl of de potentiële therapeutische effecten van verbindingen zoals amygdaline, in het kader van intracellulaire strategieën voor medicijnafgifte.

Samengevat dient de humane prostaatcarcinoomcellijn LNCaP als een hoeksteen in het begrijpen van de rol van androgenen in kankerprogressie en prostaatkanker, en biedt inzicht in hormoonresponsieve kankers, de uitdagingen van resistente prostaatkanker en het potentieel voor therapeutische interventies. De LNCaP cellijn wordt beschouwd als een van de klassieke en meest gebruikte humane prostaatkanker cellijnen, naast DU145 en PC3 cellen.

Weefsel
Prostaat
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Linker supraclaviculaire lymfeklier
Synoniemen
  • LNCAP
  • LNCap
  • Ln-Cap
  • Lymph Node Carcinoma of the prostate

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen
Karyotype
Pseudodiploïde mannetje, zeven merkerchromosomen, modaal aantal = 46, bereik = 33 tot 91
Verdubbelingstijd
60 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
LNCaP (Cytion catalogusnummer 300265)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0395

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Androgeen, oestrogeen
Eiwit-expressie
P53-positief
Producten
Menselijk prostaatzuurfosfatase, prostaatspecifiek antigeen

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met hitte-geïnactiveerde 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 tot 2 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
Om de 3 dagen
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
50 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch