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Células LNCaP
Tissue
Próstata
Disease
Carcinoma
Metastatic site
Ganglio linfático supraclavicular izquierdo
Synonyms
LNCAP, LNCap, Ln-Cap, Lymph Node Carcinoma of the prostate

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Células LNCaP

Cell line · Product number 300265

LNCaP cells, derived from a metastatic lesion in a lymph node of a prostate cancer patient, represent a critical tool in prostate cancer research, particu...

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01General information

Description

Las células LNCaP, derivadas de una lesión metastásica en un ganglio linfático de un paciente con cáncer de próstata, constituyen una herramienta fundamental en la investigación del cáncer de próstata, especialmente para estudiar el papel de los andrógenos y la dinámica del receptor de andrógenos (AR) en la progresión del cáncer. La línea celular LNCaP se caracteriza por su crecimiento sensible a los andrógenos y ofrece una perspectiva sobre los mecanismos que subyacen a la respuesta del cáncer de próstata a la manipulación hormonal.

Como modelo de cáncer de próstata metastásico, las células LNCaP originales y sus sublíneas, como el clon FGC de LNCaP, brindan información clínicamente relevante sobre la progresión de la enfermedad, especialmente en el contexto de la metástasis ósea, donde forman lesiones osteoblásticas similares a las observadas en el cáncer de próstata humano.

La línea celular LNCaP de cáncer de próstata humano expresa una forma mutada del gen AR con una especificidad de unión a esteroides más amplia y, por lo tanto, es fundamental para comprender la compleja interacción entre la actividad del AR y la progresión del cáncer de próstata. Esto incluye el análisis de dianas a valle del AR, como el PSA y el NKx3.1, que son cruciales para la función de las células epiteliales prostáticas. Las células LNCaP se utilizan además en estudios de citotoxicidad, como los inducidos por ripl o los efectos terapéuticos potenciales de compuestos como la amigdalina, en el marco de estrategias de administración intracelular de fármacos.

En resumen, la línea celular de carcinoma prostático humano LNCaP constituye una piedra angular para comprender el papel de los andrógenos en la progresión del cáncer y en el cáncer de próstata, y ofrece información sobre los cánceres sensibles a las hormonas, los desafíos que plantea el cáncer de próstata resistente y el potencial de las intervenciones terapéuticas. La línea celular LNCaP se considera una de las líneas celulares clásicas y más utilizadas del cáncer de próstata humano, junto con las células DU145 y PC3.

Tissue
Próstata
Disease
Carcinoma
Metastatic site
Ganglio linfático supraclavicular izquierdo
Synonyms
  • LNCAP
  • LNCap
  • Ln-Cap
  • Lymph Node Carcinoma of the prostate

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Tumourigenic
Sí, en ratones desnudos
Karyotype
Macho pseudodiploide, siete cromosomas marcadores, número modal = 46, rango = de 33 a 91
Doubling time
60 horas

04Identifiers

Citation
LNCaP (número de catálogo de Cytion 300265)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0395

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Andrógeno, estrógeno
Protein expression
Positivo para P53
Products
Fosfatasa ácida prostática humana, antígeno prostático específico

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS inactivado por calor
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Seeding density
De 1 a 2 × 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
Cada 3 días
Post-thaw recovery
Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
50 años
Ethnicity
caucásico