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Células LNCaP
Pañuelo de papel
Próstata
Enfermedad
Carcinoma
Lugar de metástasis
Ganglio linfático supraclavicular izquierdo
Sinónimos
LNCAP, LNCap, Ln-Cap, Lymph Node Carcinoma of the prostate

Documentos

Células LNCaP

Cell line · Número de producto 300265

Las células LNCaP, derivadas de una lesión metastásica en un ganglio linfático de un paciente con cáncer de próstata, constituyen una herramienta fundamental en la investigación del cáncer de próstata, en particular...

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01Información general

Descripción

Las células LNCaP, derivadas de una lesión metastásica en un ganglio linfático de un paciente con cáncer de próstata, representan una herramienta fundamental en la investigación del cáncer de próstata, en particular para estudiar el papel de los andrógenos y la dinámica del receptor androgénico (RA) en la progresión del cáncer. La línea celular LNCaP se caracteriza por su crecimiento sensible a los andrógenos y ofrece una ventana a los mecanismos subyacentes a la respuesta del cáncer de próstata a la manipulación hormonal.

Como modelo de cáncer de próstata metastásico, las células LNCaP parentales y sus sublíneas, como el clon LNCaP FGC, proporcionan información clínicamente relevante sobre la progresión de la enfermedad, especialmente en el contexto de la metástasis a hueso, formando lesiones osteoblásticas similares a las observadas en el cáncer de próstata humano.

La línea celular de cáncer de próstata humano LNCaP expresa una forma mutada del gen AR con una especificidad de unión a esteroides más amplia y, por tanto, es fundamental para comprender la compleja interacción entre la actividad del AR y la progresión del cáncer de próstata. Esto incluye el examen de las dianas del RA como el PSA y NKx3.1, que son cruciales para la función de las células epiteliales prostáticas. Las células LNCaP se utilizan además en estudios de citotoxicidad como los inducidos por ripl o los posibles efectos terapéuticos de compuestos como la amigdalina, en el ámbito de las estrategias de administración intracelular de fármacos.

En resumen, la línea celular de carcinoma de próstata humano LNCaP sirve de piedra angular para comprender el papel de los andrógenos en la progresión del cáncer y en el cáncer de próstata, ofreciendo una visión de los cánceres hormono-responsivos, los retos del cáncer de próstata resistente y el potencial de las intervenciones terapéuticas. La línea celular LNCaP se considera una de las líneas celulares de cáncer de próstata humano clásicas y más utilizadas, junto con las células DU145 y PC3.

Pañuelo de papel
Próstata
Enfermedad
Carcinoma
Lugar de metástasis
Ganglio linfático supraclavicular izquierdo
Sinónimos
  • LNCAP
  • LNCap
  • Ln-Cap
  • Lymph Node Carcinoma of the prostate

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos
Cariotipo
Macho pseudodiploide, siete cromosomas marcadores, número modal = 46, rango = 33 a 91
Tiempo de duplicación
60 horas

04Identificadores

Referencia
LNCaP (número de catálogo 300265 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0395

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Andrógenos, estrógenos
Expresión de proteínas
P53 positivo
Productos
Fosfatasa ácida prostática humana, antígeno prostático específico

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con FBS al 10% inactivado por calor
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 a 2 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
Cada 3 días
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
50 años
Origen étnico
Caucásico