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Células LNCaP
Tecido
Próstata
Doença
Carcinoma
Local da metástase
Linfonodo supraclavicular esquerdo
Sinónimos
LNCAP, LNCap, Ln-Cap, Lymph Node Carcinoma of the prostate

Documentos

Células LNCaP

Cell line · Número do produto 300265

As células LNCaP, derivadas de uma lesão metastática num gânglio linfático de um doente com cancro da próstata, constituem uma ferramenta fundamental na investigação do cancro da próstata, em especial...

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01Informações gerais

Descrição

As células LNCaP, derivadas de uma lesão metastática num gânglio linfático de um doente com cancro da próstata, representam uma ferramenta fundamental na investigação do cancro da próstata, particularmente para estudar o papel dos androgénios e a dinâmica do recetor de androgénio (AR) na progressão do cancro. A linha celular LNCaP é caracterizada pelo seu crescimento sensível aos androgénios e oferece uma janela para os mecanismos subjacentes à resposta do cancro da próstata à manipulação hormonal.

Como modelo de cancro da próstata metastático, as células LNCaP parentais e as suas sub-linhagens, como o clone LNCaP FGC, fornecem informações clinicamente relevantes sobre a progressão da doença, especialmente no contexto de metástases para o osso, formando lesões osteoblásticas semelhantes às observadas no cancro da próstata humano.

A linha celular de cancro da próstata humano LNCaP exprime uma forma mutante do gene AR com uma especificidade de ligação a esteróides mais ampla, pelo que é fundamental para compreender a complexa interação entre a atividade do AR e a progressão do cancro da próstata. Isto inclui o exame dos alvos a jusante do AR, como o PSA e o NKx3.1, que são cruciais para a função das células epiteliais da próstata. As células LNCaP são ainda utilizadas em estudos de citotoxicidade, como os induzidos por ripl ou os potenciais efeitos terapêuticos de compostos como a amigdalina, no âmbito de estratégias de administração intracelular de fármacos.

Em resumo, a linha celular de carcinoma da próstata humano LNCaP serve de pedra angular para a compreensão do papel dos androgénios na progressão do cancro e do cancro da próstata, oferecendo conhecimentos sobre os cancros responsivos às hormonas, os desafios do cancro da próstata resistente e o potencial para intervenções terapêuticas. A linha celular LNCaP é considerada uma das linhas celulares clássicas e mais utilizadas do cancro da próstata humano, juntamente com as células DU145 e PC3.

Tecido
Próstata
Doença
Carcinoma
Local da metástase
Linfonodo supraclavicular esquerdo
Sinónimos
  • LNCAP
  • LNCap
  • Ln-Cap
  • Lymph Node Carcinoma of the prostate

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus
Cariótipo
Pseudodiplóide masculino, sete cromossomas marcadores, número modal = 46, intervalo = 33 a 91
Tempo de duplicação
60 horas

04Identificadores

Referência
LNCaP (número de catálogo Cytion 300265)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0395

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Androgénio, estrogénio
Expressão proteica
P53 positivo
Produtos
Fosfatase ácida prostática humana, antigénio específico da próstata

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS ativado pelo calor
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 a 2 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
A cada 3 dias
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
50 anos
Etnia
Caucasiano