OE33
Cell line · Product number 305458
OE33 is a human oesophageal adenocarcinoma cell line derived from a primary tumor associated with Barrett’s oesophagus. This cell line is extensively used...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
OE33 הוא קו תאים של אדנוקרצינומה של הוושט האנושי, שמקורו בגידול ראשוני הקשור לתסמונת בארט. קו תאים זה נמצא בשימוש נרחב במחקר לחקר הביולוגיה המולקולרית והתגובות הטיפוליות של אדנוקרצינומה של הוושט, במיוחד בהקשר של התקדמות תסמונת בארט. OE33 מספק מודל רלוונטי להבנת הפתוגנזה של סרטן זה, ששכיחותו הולכת ועולה והוא קשור לפרוגנוזה גרועה בשלבים מתקדמים.
תאי OE33 מציגים מורפולוגיה אפיתלית וגדלים בהיצמדות בתנאי תרבית סטנדרטיים. קו התאים מאופיין בתכונות מולקולריות האופייניות לאדנוקרצינומה של הוושט, לרבות מוטציות ומסלולים לא מאוזנים המעורבים ביצירת הגידול, כגון מסלולי האיתות של p53 ו-HER2/neu. OE33 מועיל במיוחד לחקר התגובות התאיות להתערבויות טיפוליות המכוונות ל-HER2/neu ולמסלולים אחרים המעורבים בהתקדמות הסרטן ובעמידותו. קו תאים זה משמש גם ככלי לחקר האינטראקציות בין תאי הגידול לסביבתם המיקרו-סביבתית, וכן למנגנוני גרורות והתחמקות מהמערכת החיסונית.
במחקר פרה-קליני, OE33 נמצא בשימוש נרחב בסינון תרופות כדי להעריך את היעילות של כימותרפיה, טיפולים ממוקדים ושילובי טיפול חדשניים שמטרתם לשפר את התוצאות בטיפול באדנוקרצינומה של הוושט. בנוסף, קו התאים משמש במודלים של שתלים זרים (xenograft) להערכת יכולת היווצרות הגידול והתגובות הטיפוליות in vivo. הרלוונטיות הקלינית והמאפיינים המולקולריים של OE33 הופכים אותו למשאב יקר ערך לקידום ההבנה שלנו בנוגע לאדנוקרצינומה של הוושט ולפיתוח טיפולים יעילים למחלה אגרסיבית זו.
- Tissue
- ושט
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Synonyms
- OE-33
- JROECL 33
- JROECL33
- OEC33
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- OE33 (מספר קטלוג Cytion 305458)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0471
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- מוטציה: TP53, פשוטה, p.Cys135Tyr (c.404G>A), לא מוגדרת
- Viruses
- EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HPV-, HTLV-I/-II-, MLV-
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.1 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- יש להכין את התערובת ביחס של 1:1 בין EDTA (מלאי: 0.05%) וטריפסין (מלאי: 0.1%) בכל פעם לפני ניתוק התאים באמצעות PBS ללא Ca2+ ו-Mg2+ כדי לספק אוסמולריות פיזיולוגית. לא מומלץ להשתמש בתערובות טריפסין/EDTA מוכנות לשימוש, מכיוון שהדבר עלול לגרום להיווצרות גושים של תאים. כחלופה, ניתן להשתמש ב-TrypLE Express (Life Technologies) במקום טריפסין/EDTA. יש לפעול על פי הפרוטוקול של היצרן.
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 2–4*10^4/סמ"ר
- Fluid renewal
- 1 עד 2 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 73 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
