Přejít na obsah
OE33
Tkáň
Jícen
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
OE-33, JROECL 33, JROECL33, OEC33

Dokumenty

OE33

Cell line · Číslo výrobku 305458

OE33 is a human oesophageal adenocarcinoma cell line derived from a primary tumor associated with Barrett’s oesophagus. This cell line is extensively used...

€420.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

OE33 je buněčná linie lidského adenokarcinomu jícnu odvozená z primárního nádoru spojeného s Barrettovým jícnem. Tato buněčná linie se hojně využívá ve výzkumu k prozkoumání molekulární biologie a terapeutických reakcí adenokarcinomu jícnu, zejména v souvislosti s progresí Barrettova jícnu. OE33 představuje relevantní model pro pochopení patogeneze tohoto nádorového onemocnění, jehož incidence roste a které je v pokročilých stadiích spojeno s nepříznivou prognózou.

Buňky OE33 vykazují epiteliální morfologii a za standardních kultivačních podmínek rostou adhezivně. Tato buněčná linie se vyznačuje molekulárními rysy typickými pro adenokarcinom jícnu, včetně mutací a dysregulovaných signálních drah zapojených do tumorigeneze, jako jsou signální dráhy p53 a HER2/neu. OE33 je obzvláště užitečná pro zkoumání buněčných reakcí na terapeutické intervence zaměřené na HER2/neu a další signální dráhy podílející se na progresi rakoviny a rezistenci. Tato buněčná linie také slouží jako nástroj pro studium interakcí mezi nádorovými buňkami a jejich mikroprostředím, stejně jako mechanismů metastázování a úniku před imunitním systémem.

V předklinickém výzkumu se OE33 široce využívá při screeningu léčiv k hodnocení účinnosti chemoterapie, cílených terapií a nových kombinací léčby zaměřených na zlepšení výsledků léčby adenokarcinomu jícnu. Kromě toho se tato buněčná linie používá v modelech xenotransplantátů k posouzení tumorigenicity a terapeutických reakcí in vivo. Díky svému klinickému významu a molekulárním charakteristikám je OE33 neocenitelným zdrojem pro prohlubování našich znalostí o adenokarcinomu jícnu a pro vývoj účinných léčebných postupů pro toto agresivní onemocnění.

Tkáň
Jícen
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
  • OE-33
  • JROECL 33
  • JROECL33
  • OEC33

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
OE33 (katalogové číslo Cytion 305458)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0471

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: TP53, jednoduchá, p.Cys135Tyr (c.404G>A), nespecifikovaná
Viry
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HPV -, HTLV-I/-II -, MLV -

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Směs EDTA (zásoba 0,05 %) a trypsinu (zásoba 0,1 %) v poměru 1:1 musí být připravena vždy před oddělením buněk pomocí PBS bez Ca2+ a Mg2+, aby byla zajištěna fyziologická osmolarita. Směsi trypsinu/EDTA připravené k použití se nedoporučují, protože mohou způsobit shlukování buněk. Jako alternativu lze místo trypsinu/EDTA použít TrypLE Express (Life Technologies). Je třeba dodržovat protokol výrobce.
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2–4 × 10⁴/cm²
Obnova tekutin
1 až 2krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
73 let
Etnická příslušnost
Kavkazský