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OE33
Tessuto
Esofago
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
OE-33, JROECL 33, JROECL33, OEC33

Documenti

OE33

Cell line · Codice prodotto 305458

OE33 is a human oesophageal adenocarcinoma cell line derived from a primary tumor associated with Barrett’s oesophagus. This cell line is extensively used...

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01Informazioni generali

Descrizione

OE33 è una linea cellulare di adenocarcinoma esofageo umano derivata da un tumore primario associato all’esofago di Barrett. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata nella ricerca per studiare la biologia molecolare e le risposte terapeutiche dell’adenocarcinoma esofageo, in particolare nel contesto della progressione dell’esofago di Barrett. OE33 costituisce un modello rilevante per comprendere la patogenesi di questo tumore, la cui incidenza è in aumento ed è associata a una prognosi sfavorevole negli stadi avanzati.

Le cellule OE33 presentano una morfologia epiteliale e crescono in modo aderente in condizioni di coltura standard. La linea cellulare è caratterizzata da caratteristiche molecolari tipiche dell’adenocarcinoma esofageo, tra cui mutazioni e vie di segnalazione disregolate coinvolte nella tumorigenesi, quali la segnalazione di p53 e HER2/neu. La linea cellulare OE33 è particolarmente utile per studiare le risposte cellulari agli interventi terapeutici mirati a HER2/neu e ad altre vie implicate nella progressione del tumore e nella resistenza ai trattamenti. Questa linea cellulare funge inoltre da strumento per lo studio delle interazioni tra le cellule tumorali e il loro microambiente, nonché dei meccanismi di metastasi e di evasione immunitaria.

Nella ricerca preclinica, la linea cellulare OE33 è ampiamente impiegata nello screening farmacologico per valutare l’efficacia della chemioterapia, delle terapie mirate e di nuove combinazioni terapeutiche volte a migliorare gli esiti clinici dell’adenocarcinoma esofageo. Inoltre, la linea cellulare viene utilizzata in modelli di xenotrapianto per valutare la tumorigenicità e le risposte terapeutiche in vivo. La rilevanza clinica e le caratteristiche molecolari di OE33 ne fanno una risorsa inestimabile per approfondire la nostra comprensione dell’adenocarcinoma esofageo e sviluppare trattamenti efficaci per questa malattia aggressiva.

Tessuto
Esofago
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
  • OE-33
  • JROECL 33
  • JROECL33
  • OEC33

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
OE33 (codice catalogo Cytion 305458)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0471

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: TP53, semplice, p.Cys135Tyr (c.404G>A), non specificata
Virus
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HPV -, HTLV-I/-II -, MLV -

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,1 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
La miscela 1:1 di EDTA (stock: 0,05%) e tripsina (stock: 0,1%) deve essere preparata ogni volta prima del distacco delle cellule usando PBS senza Ca2+ e Mg2+ per fornire un'osmolarità fisiologica. Si sconsiglia di utilizzare miscele pronte all'uso di tripsina/EDTA, che potrebbero causare la formazione di grumi di cellule. In alternativa, è possibile utilizzare TrypLE Express (Life Technologies) al posto di tripsina/EDTA. Seguire il protocollo del produttore.
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
2-4*10^4/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 1 a 2 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
73 anni
Etnia
Caucasico