Mine otse sisu juurde
OE33
Kude
Söögitoru
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
OE-33, JROECL 33, JROECL33, OEC33

Dokumendid

OE33

Cell line · Toote number 305458

OE33 is a human oesophageal adenocarcinoma cell line derived from a primary tumor associated with Barrett’s oesophagus. This cell line is extensively used...

€420.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

OE33 on inimese söögitoru adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud Barrett’i söögitoruga seotud primaartuumorist. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt teadusuuringutes, et uurida söögitoru adenokartsinoomi molekulaarbioloogiat ja ravivastust, eriti seoses Barrett’i söögitoru progresseerumisega. OE33 pakub asjakohast mudelit selle vähivormi patogeneesi mõistmiseks, mille esinemissagedus on kasvanud ja mis on seotud halva prognoosiga edasijõudnud staadiumites.

OE33 rakud omavad epiteelrakkudele iseloomulikku morfoloogiat ja kasvavad standardsetes kultiveerimistingimustes adhesiivselt. Rakuliini iseloomustavad söögitoru adenokartsinoomile tüüpilised molekulaarsed tunnused, sealhulgas mutatsioonid ja kasvajate tekkega seotud häiritud signaaliteed, nagu p53 ja HER2/neu signaaliteed. OE33 on eriti kasulik rakkude reaktsioonide uurimiseks ravimeetoditele, mis on suunatud HER2/neu-le ja teistele vähktõve progresseerumise ja resistentsusega seotud signaalradadele. See rakuliin on abivahendiks ka kasvajarakkude ja nende mikrokeskkonda vaheliste vastasmõjude uurimisel, samuti metastaaside tekke ja immuunsüsteemist kõrvalehoidmise mehhanismide uurimisel.

Prekliinilistes uuringutes kasutatakse OE33 laialdaselt ravimite sõelumisel, et hinnata kemoteraapia, sihtterapiate ja uute ravikombinatsioonide tõhusust, mille eesmärk on parandada söögitoru adenokartsinoomi ravitulemusi. Lisaks kasutatakse seda rakuliini ksenotransplantaadi mudelites, et hinnata kasvajate tekkimise võimet ja ravivastust in vivo. OE33 kliiniline tähtsus ja molekulaarsed omadused muudavad selle hindamatuks ressursiks söögitoru adenokartsinoomi paremaks mõistmiseks ja selle agressiivse haiguse tõhusate ravimeetodite väljatöötamiseks.

Kude
Söögitoru
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • OE-33
  • JROECL 33
  • JROECL33
  • OEC33

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
OE33 (Cytioni katalooginumber 305458)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0471

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, lihtne, p.Cys135Tyr (c.404G>A), täpsustamata
Viirused
EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HPV-, HTLV-I/-II-, MLV-

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
EDTA (varu: 0,05%) ja trüpsiini (varu: 0,1%) 1:1 segu tuleb valmistada iga kord enne rakkude eraldamist, kasutades Ca2+ ja Mg2+ -vaba PBS-i, et tagada füsioloogiline osmolaarsus. Valmis trüpsiini/EDTA segusid ei soovitata kasutada, kuna see võib põhjustada rakuklumpide tekkimist. Alternatiivina võib kasutada trüpsiini/EDTA asemel TrypLE Expressi (Life Technologies). Tuleb järgida tootja protokolli.
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2–4 × 10⁴/cm²
Vedeliku vahetus
1 kuni 2 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
73 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia