IM-9
Cell line · Product number 302151
IM-9 is a human lymphoblastoid cell line established in 1967 from the bone marrow of an adult woman diagnosed with multiple myeloma. Originally believed t...
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01General information
- Description
A IM-9 é uma linhagem celular linfoblastoide humana estabelecida em 1967 a partir da medula óssea de uma mulher adulta diagnosticada com mieloma múltiplo. Embora inicialmente se acreditasse que fossem derivadas de células de mieloma, pesquisas posteriores, incluindo descobertas publicadas por Pellat-Deceunynk et al. em 1995, indicaram que as células IM-9 são mais precisamente classificadas como células linfoblastoides B positivas para o vírus de Epstein-Barr (EBV+) do que como células de mieloma malignas. Essa distinção é crucial para os pesquisadores que utilizam essa linhagem celular, pois afeta a interpretação dos resultados experimentais relacionados aos estudos sobre mieloma.
As células IM-9 foram amplamente caracterizadas na literatura e são conhecidas por sintetizarem imunoglobulina G (IgG). Sabe-se também que elas expressam receptores para insulina e calcitonina, o que as torna valiosas para o estudo das interações entre hormônios e receptores. Além disso, essas células expressam o mRNA do BCL2, um gene envolvido na regulação da apoptose, frequentemente estudado no contexto do câncer e da sobrevivência das células imunológicas. Devido à sua alta expressão de receptores de insulina, as células IM-9 são frequentemente utilizadas em pesquisas focadas na sinalização da insulina e em distúrbios metabólicos, proporcionando insights sobre os mecanismos de resistência à insulina.
A linhagem celular IM-9 continua sendo um recurso significativo para diversas aplicações de pesquisa, particularmente nos campos da imunologia, biologia do câncer e estudos metabólicos. No entanto, dada a compreensão revisada de sua origem, é fundamental utilizar as células IM-9 com o reconhecimento de que elas não são representativas de células de mieloma maligno. Como sempre, essas células destinam-se exclusivamente à pesquisa in vitro e não são adequadas para uso terapêutico ou in vivo.
- Tissue
- Medula óssea
- Synonyms
- IM 9
- IM9
- GM04680
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- Células redondas agrupadas
- Cell type
- Linfoblasto B
04Identifiers
- Citation
- IM-9 (número de catálogo da Cytion 302151)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1305
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- CD19+, CD20+, CD23+, CD27+, CD80+, CD83+, CD138+, MHC I+, MHC II+
- Viruses
- EBV+ livre de vírus patogênicos para o ser humano, como SV40, JC/BK, HBV, HCV e HIV.
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione ao meio 10% de FBS inativado por calor
- Subculturing
- Homogeneíze suavemente a suspensão celular no frasco por meio de pipetagem para cima e para baixo e, em seguida, colete uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão com meio de cultura fresco até atingir uma concentração celular de 1 x 10⁵ células/ml e distribua a suspensão ajustada em alíquotas em novos frascos para continuação do cultivo.
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Rápido
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- Não especificado
- Ethnicity
- caucasiano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
