Siirry sisältöön
IM-9
Kudos
Luuydin
Synonyymit
IM 9, IM9, GM04680

Asiakirjat

IM-9

Cell line · Tuotenumero 302151

IM-9 is a human lymphoblastoid cell line established in 1967 from the bone marrow of an adult woman diagnosed with multiple myeloma. Originally believed t...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

IM-9 on ihmisen lymfoblastoidinen solulinja, joka on perustettu vuonna 1967 aikuisen naisen luuytimestä, jolla oli todettu multippeli myelooma. Alun perin sen uskottiin olevan peräisin myeloomasoluista, mutta myöhemmät tutkimukset, mukaan lukien Pellat-Deceunynkin ja muiden vuonna 1995 julkaisemat havainnot, ovat osoittaneet, että IM-9:n solut luokitellaan pikemminkin Epstein-Barr-viruspositiivisiksi (EBV+) B-lymfoblastosoluiksi kuin pahanlaatuisiksi myeloomasoluiksi. Tämä erottelu on ratkaisevan tärkeää tätä solulinjaa käyttäville tutkijoille, koska se vaikuttaa myeloomatutkimuksiin liittyvien kokeellisten tulosten tulkintaan.

IM-9-soluja on luonnehdittu laajasti kirjallisuudessa, ja niiden on todettu syntetisoivan immunoglobuliini G:tä (IgG). Niiden tiedetään myös ilmentävän insuliini- ja kalsitoniinireseptoreita, mikä tekee niistä arvokkaita hormonireseptorien vuorovaikutuksen tutkimisessa. Lisäksi nämä solut ilmentävät BCL2-mRNA:ta, geeniä, joka osallistuu apoptoosin säätelyyn, jota tutkitaan usein syövän ja immuunisolujen selviytymisen yhteydessä. Koska IM-9-solut ilmentävät runsaasti insuliinireseptoreita, niitä käytetään usein insuliinisignalointiin ja aineenvaihduntahäiriöihin keskittyvissä tutkimuksissa, joissa saadaan tietoa insuliiniresistenssin mekanismeista.

IM-9-solulinja on edelleen merkittävä resurssi erilaisiin tutkimussovelluksiin erityisesti immunologian, syöpäbiologian ja aineenvaihduntatutkimusten aloilla. Koska niiden alkuperää koskeva käsitys on kuitenkin muuttunut, on ratkaisevan tärkeää käyttää IM-9-soluja tietäen, että ne eivät edusta pahanlaatuisia myeloomasoluja. Kuten aina, nämä solut on tarkoitettu yksinomaan in vitro -tutkimukseen, eivätkä ne sovellu terapeuttiseen tai in vivo -käyttöön.

Kudos
Luuydin
Synonyymit
  • IM 9
  • IM9
  • GM04680

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Pyöreät solut klusterissa
Solutyyppi
B-lymfoblasti

04Tunnisteet

Lähdeviite
IM-9 (Cytionin luettelonumero 302151)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1305

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
CD19+, CD20+, CD23+, CD27+, CD80+, CD83+, CD138+, MHC I+, MHC II+, CD19+, CD20+, CD23+, CD27+, CD80+, CD83+, CD138+, MHC I+, MHC II+
Virukset
EBV+ vapaa ihmisen patogeenisistä viruksista SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Soluviljely
Homogenoi solususpensio varovasti pullossa pipetoimalla ylös ja alas, ota sitten edustava näyte solutiheyden määrittämiseksi millilitraa kohti. Laimenna suspensio tuoreella viljelyalustalla solupitoisuudeksi 1 x 105 solua/ml ja jaa säädetty suspensio uusiin pulloihin jatkokäsittelyä varten.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Nopea
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Määrittelemätön
Etnisyys
Kaukasialainen